[发明专利]紫花丹参组培快繁方法无效
| 申请号: | 201410036840.3 | 申请日: | 2014-01-25 |
| 公开(公告)号: | CN103798137A | 公开(公告)日: | 2014-05-21 |
| 发明(设计)人: | 雷世俊;房师梅;王洪波;丁雪珍 | 申请(专利权)人: | 潍坊职业学院 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 261041 山东省潍坊*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 紫花 丹参 组培快繁 方法 | ||
1.紫花丹参组培快繁方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一,外植体处理,选取紫花丹参带腋芽的茎为外植体,剪取长度为2~3cm的外植体;将外植体置于盛有洗洁精水的瓶内,不断摇晃清洗13~17min,然后用清水将外植体反复冲洗干净,再用75%的酒精消毒0.4~0.6min后,用0.1%的HgCl2溶液消毒灭菌8~12min,最后用无菌水冲洗3~5次,每次不少于1min;
步骤二,接种诱导培养,采用MS+6-BA0.8~1.2mg/L+NAA0.08~0.12mg/L培养基,培养基分装在100~150mL的瓶中,每瓶接种一个外植体,两层封口膜加两层玻璃纸封口;接种外植体的瓶放在光照培养架上培养,培养温度为23~27℃,湿度75%~80%,培养6~8天;
步骤三,生根培养,将诱导培养的无菌小苗的茎切成带节的小段,接种于1/2MS+NAA(0.3~0.5)mg/L分化培养基中培养,在此培养基中培养8~12天,培养温度为23~27℃,湿度75%~80%,有大量须根生出,13~15天后,每株丹参1~2条较粗壮的根,且根上有大量侧根;
步骤四,生根培养的小苗根长到3~5cm时,将瓶拿到培养室外常温下放置5~7天后打开瓶盖炼苗3~5天;
步骤五,将瓶中的小苗取出,用清水冲洗干净,在栽植基质中进行驯化栽植。
2.如权利要求1所述的紫花丹参组培快繁方法,其特征在于,在所述步骤一中,外植体处理,选取紫花丹参带腋芽的茎为外植体,剪取长度为2.5cm的外植体;将外植体置于盛有洗洁精水的瓶内,不断摇晃清洗15min,然后用清水将外植体反复冲洗干净,再用75%的酒精消毒0.5min后,用0.1%的HgCl2(升汞)溶液消毒灭菌10min,最后用无菌水冲洗4次,每次不少于1min。
3.如权利要求1所述的紫花丹参组培快繁方法,其特征在于,在所述步骤二中,接种诱导培养,采用MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L培养基,培养基分装在100~150mL的瓶中,每瓶接种一个外植体,两层封口膜加两层玻璃纸封口;接种外植体的瓶放在光照培养架上培养,每个光照培养架层安装2支40W日光灯,光照时间12小时/天,培养温度为23~27℃,湿度75%~80%,6~8天后即可达到转接要求。
4.如权利要求1所述的紫花丹参组培快繁方法,其特征在于,在所述步骤三中,生根培养,将诱导培养的无菌小苗的茎切成带节的小段,接种于1/2MS+NAA0.4mg/L分化培养基中培养,在此培养基中培养10天,培养温度为23~27℃,湿度75%~80%,即有大量须根生出,在14天后,每株丹参有1~2条较粗壮的根,且根上有大量侧根。
5.如权利要求1至4任一权利要求所述的紫花丹参组培快繁方法,其特征在于,在所述步骤五中,栽植基质为蛭石+珍珠岩按1:1配比,栽植株行距10×20cm;栽后喷水,加盖塑料薄膜,用遮荫网遮光,以后间隔5天喷水1次,移栽7天后再进行叶面喷肥,温度控制在20~25℃,随着幼苗的生长,逐步加强光照,增加通风。
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