[发明专利]SPARC血管发生结构域及使用方法

说明书

本申请是申请号为No.201080018313.X、申请日为2010年3月11日、发明名称为“SPARC血管发生结构域及使用方法”的中国发明专利申请的分案申请。

对相关申请的交叉引用

本专利申请要求2009年3月11日提交的美国临时专利申请号61/159,322的权益。

发明背景

酸性的富含半胱氨酸的分泌蛋白(Secreted Protein,Acidic,Rich in Cysteines,SPARC)也被称作骨粘连蛋白(osteonectin)，是286个氨基酸的糖蛋白。SPARC对多种配体具有亲和力，包括阳离子（例如Ca²⁺、Cu²⁺、Fe²⁺）、生长因子（例如血小板衍生生长因子(PDGF)和血管内皮生长因子(VEGF)）、胞外基质(ECM)蛋白(例如胶原I-V和胶原IX、玻连蛋白和血小板反应蛋白-1)、内皮细胞、血小板、白蛋白和羟基磷灰石。SPARC表达在发育上受到调控，主要在正常发育期间或响应于损伤而发生重塑的组织中表达（参见例如Lane等人,FASEB J.8,163-173(1994)）。在发育中的骨和牙齿中高水平表达SPARC蛋白。

SPARC在几种侵袭性癌症中上调，但是在绝大多数正常组织中缺失（Porter等人,J.Histochem.Cytochem.,43,791(1995)及见下文）。SPARC表达在多种肿瘤中受到诱导（例如膀胱、肝、卵巢、肾、肠、和乳腺）。例如，在膀胱癌中，SPARC表达与晚期癌有关。显示了T2期或更晚期的侵入性膀胱肿瘤比T1期的膀胱肿瘤（或不太浅表的肿瘤）表达更高水平的SPARC，而且具有更差的预后（参见例如Yamanaka等人,J.Urology,166,2495-2499(2001)）。在脑膜瘤中，SPARC表达只与侵入性肿瘤有关（参见例如Rempel等人,Clincal Cancer Res.,5,237-241(1999)）。还在74.5%的原位侵入性乳腺癌损害（参见例如Bellahcene等人,Am.J.Pathol.,146,95-100(1995)）和54.2%的浸润性乳腺导管癌（参见例如Kim等人,J.Korean Med.Sci.,13,652-657(1998)）中检测出SPARC表达。SPARC表达还与乳腺癌中频繁的微钙化有关（参见例如Bellahcene等人,见上文），提示SPARC表达可能负责乳腺转移对骨的亲和力。还知道SPARC结合白蛋白（参见例如Schnitzer,J.Biol.Chem.,269,6072(1994)）。

因此，需要利用SPARC在疾病中的作用，例如SPARC在一些癌症中的作用的组合物和方法。特别地，需要利用SPARC结构域特异性活性，诸如SPARC羧基末端血管发生结构域的组合物和方法。

发明概述

本发明提供了包含SEQ ID NO:1所示序列的分离的多肽，其包含分离的SPARC血管发生结构域。另外，本发明提供了分离的多肽，其包含SEQ ID NO:1的序列，其中有至多5个保守氨基酸变化或与SEQ ID NO:1有90%相同，并且其中突变的分离的SPARC多肽保留SEQ ID NO:1的血管发生活性的至少60%。

本发明还提供了分离的多肽，其包含SEQ ID NO:1的序列，其中有至多5个非保守氨基酸变化，并且其中所述突变的分离的SPARC多肽保留SEQ ID NO:1的血管发生活性的至少60%。

本发明还提供了用于在需要血管发生的动物中刺激血管发生的方法，包括施用治疗有效量的包含SEQ ID NO:1所示序列的纯化多肽和/或包含SEQ ID NO:1的突变序列的分离多肽，其中有至多5个保守氨基酸变化或与SEQ ID NO:1有90%相同，并且其中所述突变的分离的SPARC多肽保留SEQ ID NO:1的血管发生活性的至少60%。

本发明还提供了用于在需要血管发生的动物中刺激血管发生的方法，包括施用治疗有效量的包含SEQ ID NO:1所示序列的纯化多肽和/或包含SEQ ID NO:1的突变序列的分离多肽，其中有至多5个非保守氨基酸变化，并且其中所述突变的分离的SPARC多肽保留SEQ ID NO:1的血管发生活性的至少60%。