[发明专利]一种提高红小豆降血糖效果的物质的确定方法

说明书

技术领域

本发明涉及物质的确定方法，具体而言，本发明涉及一种提高红小豆降血糖效果的物质的确定方法。 

背景技术

在过去，红豆由于其高纤维及蛋白含量，被推荐为降糖食物。植物化学家对红豆中化学成分进行分析，发现其富含酚类化合物，儿茶素、绿原酸等。红豆具有α-葡萄糖苷酶抑制活性，对链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠血糖有改善作用。红豆汁可降低甘油三酯并抑制胰脂肪酶活性，有利于防治高甘油三酯血症。在保健功能食品领域，对小豆的深入研究开发相对较少，尤其对小豆粉起降糖作用的中关键生物活性物质缺乏研究。 

发明内容

本发明的目的是提供一种提高红小豆降血糖效果的物质的确定方法。药理实验结果表明，通过挤压膨化制备的小豆粉多糖和蛋白含量更高，降血糖功效更好。 

本发明为解决上述技术问题采用的技术方案是：一种提高红小豆降血糖效果的物质的确定方法，包括下列步骤： 

（1）未经过挤压膨化的红小豆的蛋白和多糖的纯化： 

A、粉碎、筛选：取质量合格的红小豆，粉碎、过筛，测定获得的物质的成分； 

B、蛋白纯化：采用常规酸碱沉降法进行蛋白纯化； 

C、粗多糖常规纯化： 

a、粗多糖液制备； 

b、粗多糖纯化； 

（2）经过挤压膨化的红小豆的蛋白和多糖液纯化： 

A、粉碎、筛选：取质量合格的红小豆，粉碎、过筛； 

B、加水搅拌：在红小豆粉中添加8-10%的水，用搅拌机搅拌均匀； 

C、挤压膨化：取搅拌后的红小豆粉，放入挤压机中进行挤压膨化； 

D、粉碎、筛选：将挤压膨化后的红小豆粉粉碎、过筛，测定获得的物质的成分，比较挤压膨化前后的物质成分变化； 

E、蛋白纯化：采用常规酸碱沉降法进行蛋白纯化； 

F、粗多糖常规纯化： 

a、粗多糖液制备； 

b、粗多糖纯化； 

（3）利用体外测定糖苷酶一致的方法比较经过挤压膨胀前后的蛋白和多糖对α糖苷酶的抑制活性。 

所述过筛为过55-65目筛。 

所述进行蛋白纯化的酸碱沉降法的具体做法为：称取原料粉末用蒸馏水按照1：8比例浸泡过夜，3500r离心5-15min，收集上清用1M氢氧化钠调pH到8.0-10.0，磁力搅拌25-35min，5000r离心15-25min，收集上清液。用1N盐酸调pH到6.0-8.0，5000r离心15-25min，弃去上清液，沉淀用去离子水润洗2-3遍，冻干备用。 

所述粗多糖液制备的具体做法为：称取原料粉，浸泡20-40min，加15-25倍量水超声溶解豆粉，溶液加无水乙醇使含醇量达70-90%，3-5℃冷藏过夜，3500r离心15-25min，沉淀加5-15mL水溶解，得到粗多糖液。 

所述粗多糖纯化的具体做法为：粗多糖液加10%三氯乙酸水溶液0.5-1.5mL，3-5℃冷藏过夜，3500r离心15-25min，取上清液，再加无水乙醇使含醇量达到70-90%，3-5℃冷藏过夜，4500r离心5-10min，弃去上清液，沉淀加5-15mL水溶解再加0.5%活性炭，沸水煮25-35min，过滤，加蒸馏水定容于25mL容量瓶。 

所述挤压膨化过程中挤压机Ⅰ区温度范围为140-180℃、Ⅱ区温度范围为120-160℃。 

本发明的有益效果是： 

1、通过比较挤压膨化前后的物质成分变化，很容易发现经过挤压膨胀的蛋白和多糖含量显著增高。经过挤压膨胀的小豆的蛋白和多糖具有明显较高的α糖苷酶一致活性。 

2、利用体外测定糖苷酶一致的方法，能够轻松测定经过挤压膨化的红小豆粉与未经过挤压膨化红小豆粉的糖苷酶抑制率，结果显示可提高糖苷酶抑制率4倍以上。 

附图说明

图1为为挤压膨胀红小豆粉对正常鼠降血糖活性实验结果图 

图2为挤压膨胀红小豆粉对糖尿病鼠降血糖活性实验结果图 

图3为挤压膨胀红小豆蛋白对糖尿病鼠降血糖活性实验结果图 

图4为挤压膨胀红小豆蛋白对糖尿病鼠口服葡萄糖耐量影响结果图 

具体实施方式

实施例1： 

一种提高红小豆降血糖效果的物质的确定方法，包括下列步骤： 

（1）未经过挤压膨化的红小豆的蛋白和多糖的纯化： 

A、粉碎、筛选：取质量合格的红小豆，粉碎、过55目筛，测定获得的物质的成分；