[发明专利]治疗剂的递送

权利要求书

1.一种体外或离体产生纳米囊泡的方法，所述纳米囊泡包含针对人c-Myc基因或其基因产物的抑制剂寡核苷酸，所述方法包括

a)用包含L-Myc基因的构建体转染或转导哺乳动物细胞；

b)在允许所述哺乳动物细胞过表达所述L-Myc基因的条件下维持所述哺乳动物细胞；

c)将编码能够抑制人c-Myc基因或其基因产物的抑制剂寡核苷酸的DNA序列引入所述哺乳动物细胞，其中所述抑制剂寡核苷酸不抑制L-Myc，并且其中所述DNA序列是选自由SEQID NO:185、186、188、189、190、191、192、193和195组成的组的DNA序列；以及

d)从所述哺乳动物细胞获得包含所述抑制剂寡核苷酸的纳米囊泡,

其中所述哺乳动物细胞是人胚胎肾(HEK)细胞、成纤维细胞或间充质干细胞，并且其中获得所述哺乳动物细胞的方式不涉及胚胎细胞的使用。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞在细胞表面上表达靶向分子。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述方法包括，在步骤c)之前或与步骤c)同时，引入编码待在细胞表面上表达的靶向分子的DNA序列。

4.根据权利要求2所述的方法，其中所述靶向分子是特异性结合癌细胞上过表达的表面蛋白的配体。

5.根据权利要求3所述的方法，其中所述靶向分子是特异性结合癌细胞上过表达的表面蛋白的配体。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其中所述靶向分子是表皮生长因子(EGF)、促黑激素(MSH)或针对癌细胞上过表达的表面蛋白的抗体的可变区或所述抗体的fab-片段。

7.根据权利要求1、2、4和5中任一项所述的方法，其中所述哺乳动物细胞是HEK 293细胞或NIH 3T3小鼠成纤维细胞。

8.根据权利要求3所述的方法，其中所述哺乳动物细胞是HEK 293细胞或NIH 3T3小鼠成纤维细胞。

9.根据权利要求6所述的方法，其中所述哺乳动物细胞是HEK 293细胞或NIH 3T3小鼠成纤维细胞。

10.根据权利要求1、2、4、5、8和9中任一项所述的方法，其中步骤c)包括引入遗传构建体，所述遗传构建体包含可操作地连接至诱导型启动子的编码能够抑制人c-Myc基因的抑制剂寡核苷酸的所述DNA序列，且通过激活所述诱导型启动子诱导表达。

11.根据权利要求3所述的方法，其中步骤c)包括引入遗传构建体，所述遗传构建体包含可操作地连接至诱导型启动子的编码能够抑制人c-Myc基因的抑制剂寡核苷酸的所述DNA序列，且通过激活所述诱导型启动子诱导表达。

12.根据权利要求6所述的方法，其中步骤c)包括引入遗传构建体，所述遗传构建体包含可操作地连接至诱导型启动子的编码能够抑制人c-Myc基因的抑制剂寡核苷酸的所述DNA序列，且通过激活所述诱导型启动子诱导表达。

13.根据权利要求7所述的方法，其中步骤c)包括引入遗传构建体，所述遗传构建体包含可操作地连接至诱导型启动子的编码能够抑制人c-Myc基因的抑制剂寡核苷酸的所述DNA序列，且通过激活所述诱导型启动子诱导表达。

14.一种分离的纳米囊泡，所述分离的纳米囊泡由根据前述权利要求中任一项所述的方法来产生。

15.一种组合物，所述组合物包含根据权利要求14所述的分离的纳米囊泡和药学上可接受的载体。