[发明专利]在不存在全能核酸酶的情况下分离synagis*的方法

权利要求书

1.一种从包含的组合物分离的方法，该方法包括：

i.对该组合物进行一个离子交换色谱过程；

ii.对该组合物进行一个亲和纯化过程；并且

iii.对该组合物进行一个过滤过程；

其中一种终产物包括获得自(i)、(ii)、和(iii)的其中该终产物适合于向人类给予并且具有≤0.5pg/mg的DNA浓度，并且其中该方法不包括向该组合物中添加全能核酸酶。

2.一种从包含的组合物分离的方法，该方法包括：

i.对该组合物进行一个阳离子交换色谱过程以形成一种包含的第一产物；

ii.添加一种缓冲液到该第一产物中以形成一种缓冲产物；

iii.对该缓冲产物进行一个亲和纯化过程以形成一种包含的第二产物；

iv.对该第二产物进行一个过滤过程以形成一种包含的第三产物；

v.对该第三产物进行一个病毒灭活过程；并且

vi.配制该第三产物以形成一种终产物，该终产物包含其中该终产物适合于向人类给予并且具有≤0.5pg/mg的DNA浓度；

其中该方法不包括向该组合物中添加全能核酸酶。

3.一种从包含的组合物分离的方法，该方法包括(i)-(v)中的至少三个：

i.对该组合物进行一个阳离子交换色谱过程；

ii.对该组合物进行一个亲和纯化过程；

iii.对该组合物进行一个超滤过程；

iv.对该组合物进行一个病毒灭活过程；并且

v.对该组合物进行一个阴离子交换色谱过程；

其中获得自(i)-(v)中的至少三个的产物包含并且适合于向人类给予并且具有≤0.5pg/mg的DNA浓度；并且其中该方法不包括向该组合物中添加全能核酸酶。

4.如权利要求1所述的方法，其中该方法不包括添加一种外源核酸酶到该组合物中。

5.如权利要求1所述的方法，进一步包括一个病毒灭活过程。

6.如权利要求5所述的方法，其中该病毒灭活过程包括在pH小于4.0下孵育该组合物。

7.如权利要求1所述的方法，其中该抗体是IgG。

8.如权利要求1所述的方法，其中该亲和纯化过程包括一个蛋白A纯化过程。

9.如权利要求1所述的方法，其中该离子交换色谱过程是一个阳离子交换色谱过程。

10.如权利要求9所述的方法，其中该阳离子交换过程包括吸附该抗体到选自下组的一种阳离子树脂上，该组由以下各项组成：卡普托S(Capto S)、S-交联琼脂糖FF(S-Sepharose FF)、以及波罗斯50HS(Poros 50HS)。

11.如权利要求1所述的方法，进一步包括一种第二离子交换过程。

12.如权利要求11所述的方法，其中该第二离子交换过程是一个阴离子交换色谱过程。

13.如权利要求12所述的方法，其中该阴离子交换过程包括使该抗体穿过选自下组的一种阴离子膜，该组由以下各项组成：超级Q(Super Q)、那翠丝Q(Natrix Q)、科罗马索布Q(Chromasorb Q)以及木斯塘Q(Mustang Q)。

14.如权利要求1所述的方法，其中该终产物具有>80％(mol/mol)的抗体得率和/或其中该终产物的DNA浓度≤200ng/mg。

15.如权利要求1所述的方法，其中该组合物选自下组，该组由以下各项组成：免疫动物血清、腹水液、杂交瘤或骨髓瘤上清液、衍生自重组细胞系培养的条件培养基、产免疫球蛋白细胞的细胞提取物、以及生物反应器制剂。

16.如权利要求1所述的方法，其中该组合物具有大于100升的体积。

17.如权利要求1所述的方法，其中该组合物具有大于1000升的体积。

18.如权利要求1所述的方法，其中(ii)的过程发生在(i)的过程后。

19.如权利要求1所述的方法，其中(iii)的过程发生在(ii)的过程后。

20.如权利要求1所述的方法，其中包括：

具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的重链以及具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的轻链；

SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的重链可变区以及轻链SEQ ID NO:6的轻链可变区；或

具有氨基酸序列TSGMSVG(SEQ ID NO:3)的H1互补决定区(CDR)、具有氨基酸序列DIWWDDKKDYNPSLKS(SEQ ID NO:4)的H2CDR、具有氨基酸序列SMITNWYFDV(SEQ ID NO:5)的H3CDR；具有氨基酸序列KCQLSVGYMH(SEQ ID NO:7)的L1CDR、具有氨基酸序列DTSKLAS(SEQ ID NO:8)的L2CDR、以及具有氨基酸序列FQGSGYPFT(SEQ ID NO:9)的L3CDR。