[发明专利]可以在用于氧化的表面的涂层剂、增粘剂或粘合剂中使用的肽

说明书

本发明涉及用于氧化的表面的涂层剂、增粘剂或粘合剂，含肽，尤其是十二肽，涉及含有完全或部分由十二肽组成的化合物的多层复合物或经涂覆的基质，所述化合物作为所述复合物的至少两个相邻层之间或涂层与基质之间的增粘剂，还涉及可以用作用于氧化的表面的涂层剂、增粘剂或粘合剂的十二肽。

在氧化的表面的涂层或着色的领域，已知的促进粘附的方法涉及双功能的有机硅烷化合物，例如，所述方法建立了涂料的聚合物基体和无机基质之间的化学键。这些增粘剂的缺点之一是仅当可以与硅烷相互作用的羟基基团存在于基质的表面上，才能确保最佳粘附。因此，许多情况下，基质的复杂预处理对于表面的硅烷化是必要的。另外，定制材料的制造是非常复杂的，此外，并不是对于所有基质，定制材料都是已知的。

自1940年以来，对自组装单层膜(SAM，也称为自组织单层膜)进行了研究和描述，但直到1983年人们才开始努力对这种组织方法的进行技术利用。

原则上，自组装单层膜有两个不同的活性基团，在它们之间存在间隔物，例如脂肪族间隔物。其一个基团与表面相互作用，而另一端的基团具有特定性质或连接到另一个官能化合物。SAM形成抵抗水的侵害的化学键，同时，所述化学键能够防止所有在夹层的电化学反应。在固体表面上的单分子层的自组织提供用于生产具有一定组成、结构以及厚度的夹层的有效方法。选择性自组织增粘剂具有的优点是，它们保证涂料层和粘合剂层以长使用寿命粘附到金属表面，这在汽车领域是必要的，例如防腐蚀的进一步改进。所述自组织增粘剂还允许均匀的涂料层的一贯良好地粘附在复合材料上，其正在越来越多地使用，并且具有不同的表面，如塑料-金属复合材料。

自组织单层用于半导体技术，例如，对于电极的表面稳定化和定制官能化。渗透性和电荷传送速率收到影响，取决于所用的烷基链的长度。应用自组织单层膜的领域非常广阔。自组织单层膜的技术尤其应用于电化学扫描隧道显微镜、细胞研究、传感器系统和纳米电子学。然而，在现有技术中所描述的SAM的生产复杂且成本高。

无机基质和生物学成分耦合以修饰表面特性在仿生学中是已知的。从噬菌体文库选择的呈现短肽的噬菌体已用于，例如，沉淀和分离无机材料(WO 2003/078451)。此外，无机基质和特异性肽配体组成的混合材料被用作改变基质表面的潜在方法。然而，鉴定与基质匹配的生物配体(通常是肽)耗时且成本高，并且在此之前已排除具体应用。在现有技术中提出了用于结合两个无机成分的双功能配体概念。特别地，例如，在WO 2004/035612中描述了，通过有双功能结合性质的噬菌体，将细胞或生物分子与聚合物基质，尤其是掺杂氧化氯的聚吡咯(PPyCI)或聚(乳酸共乙醇酸)(PLGA)结合。没有进一步描述进一步结合到另一种物质，其不是所用噬菌体的生物学结合伴侣，例如涂层材料；这种结合同样将必须选择性发生以及需要配体和进一步的结合成分的完全匹配。

因此，对于提供新型化合物有很大的需求，所述化合物适合于在氧化的表面上使用，以及避免所述的现有技术的缺点。

已经令人惊奇地发现，某些十二肽用作用于氧化的表面的涂层剂、增粘剂或粘合剂具有优势。

因此，本发明的主题涉及一种定量方法，用于确定粘附的肽，尤其是十二肽在氧化的表面上的粘附性质，其特征在于：

a)将含肽溶液施加到有氧化的表面的运载体，并使其干燥，

b)通过洗涤，从所述运载体上去除未结合的肽，并使运载体干燥，

c)用染色溶液对粘附于运载体的肽进行染色，将剩余的染色溶液洗掉，并使所述运载体干燥，

d)用提取溶液将粘附于运载体的染色的肽从运载体上去除，含有染色的肽的上清经过分光光度计测量。

优选地，根据的发生通过所述肽的简单非特异性的染色，例如使用考马斯染色溶液的染色，或者通过导致特异性结合的化学反应，与例如茚三酮的化学反应，进行本发明的方法的步骤c)中的染色。

尤其有利地，本发明的定量方法的步骤a)到d)如下实施：

在步骤a)中，将2份10μL的肽溶液，浓度为2mg/mL，溶于1×PBS，pH 7.4来自Gibco，施加到直径为2.3cm的圆形HGD钢板，其中第一个10μL干燥大约15分钟，第二个10μL随后滴到相同的位置，干燥30分钟，接着在来自UVP Laboratory Products的HB-1000杂交炉里，在30℃，存在200毫升水的情况下干燥。