[发明专利]粒子凝集测定用胶乳粒子

说明书

技术领域

本发明涉及一种粒子凝集测定用胶乳粒子、和使用了该粒子的粒子凝集测定试剂，所述粒子凝集测定用胶乳粒子能够高度抑制非特异性反应，并且能够进行高灵敏度测定。

背景技术

作为在临床检验领域中对被检体中的微量物质进行定量的方法，广泛进行着利用了抗原抗体反应的免疫测定法。其中，使用了担载有抗体等的胶乳粒子(以下有时称作敏化胶乳粒子)的胶乳免疫比浊法简便且测定时间短，因此被检验室等广泛使用。基于胶乳免疫比浊法而进行的被检体中的抗原或抗体的定量，通过对与免疫复合体形成相伴的敏化胶乳粒子的凝集所致的吸光度变化进行光学检测来进行。该吸光度的变化基于敏化胶乳粒子的凝集所致的表观的粒径变化。

一直以来，如专利文献1所记，胶乳免疫比浊法中，由于与检测对象物质特异性地进行反应的抗原或抗体的固定化(敏化)容易实施、比较廉价、并且聚合反应也容易控制，因此，一直使用的是以聚苯乙烯为主成分的聚苯乙烯系胶乳粒子。但是，聚苯乙烯系胶乳粒子虽然具有能够物理性地吸附(敏化)抗原、抗体的优点，但另一方面，由于也吸附被检体中的非检测对象蛋白质等，因此有时引起不基于抗原抗体反应这种特异性反应的敏化胶乳粒子的凝集反应、所谓的非特异性反应，该非特异性反应的抑制一直以来都是问题。

专利文献1中，为了抑制非特异性反应，尝试了利用牛血清白蛋白(BSA)等将对抗原、抗体进行了敏化后的胶乳粒子封闭，但大多无法取得充分的效果，给出了高背景值，因此，在制作能够进行高灵敏度测定的试剂的方面存在重大课题。

专利文献2中，使用苯乙烯、下述通式所示的化合物、苯乙烯磺酸的盐和水溶性自由基聚合引发剂并在水中使它们进行共聚，制成聚合物粒子，并制作了诊断剂用载体粒子。认为由此可抑制非特异性反应，但是按照以高浓度含有负责抑制非特异性反应的下述通式的化合物的方式制作的聚合物粒子，难以使抗原、抗体物理吸附于粒子表面，无法实现作为诊断剂用载体的目的。另外，专利文献2中没有示出在制作载体粒子时使用苯乙烯、下述通式所示的化合物、苯乙烯磺酸的盐和水溶性自由基聚合引发剂以外的化合物。

CH₂＝CR₃-COO(CH₂CH₂O)_X(CH(CH₃)CH₂O)_y(CH₂CH₂O)_ZR₄

(式中，R₃表示H或CH₃，R₄表示H或CH₃，x、y和z分别为0或100以下的整数，x、y、z满足1≤x+y+z≤100)

专利文献3和专利文献4中公开了一种免疫学的测定用试剂，该免疫学的测定用试剂使用以下述通式所示的化合物为主成分单体而构成的聚合物类作为凝集促进剂。记载了：此时，聚合物虽然可以为共聚物，但下述通式的构成单元优选在聚合物中含有20％以上，另外，作为共聚物中的下述通式以外的构成单元，可以使用苯乙烯衍生物。但是，共聚物以链状聚合物的形式在反应液中以游离状态存在，完全没有示出以胶乳粒子的形态加以使用的情况。另外，专利文献4中记载了，在反应液中添加了聚乙二醇等凝集促进剂的情况下，由于盐析而产生非特异性浑浊，空白值上升，但在使用由下述通式所示的化合物作为主成分单体而构成的聚合物类作为凝集促进剂的情况下，不易产生盐析所致的非特异性浑浊。但是，专利文献4中完全没有示出这些聚合物类能够抑制非特异性地引起凝集反应的偏离被检体等的过剩凝集。

CH₂＝CR₆-CO-X-R₅-O(PO₂)OR₄-N-(R₁)(R₂)(R₃)

(式中，R₁至R₃分别独立地表示氢原子或可以具有羟基的烷基，R₄表示亚烷基，R₅表示可以具有取代基并且链中可以具有氧原子的亚烷基，R₆表示氢原子或甲基，X表示氧原子或-NH-基)

现有技术文献

专利文献

专利文献1：专利第3708942号公报

专利文献2：日本特公昭58-34486号公报

专利文献3：日本特开2005-106609号公报