[发明专利]复合物特异性抗体和抗体片段及其用途

说明书

本发明提供了特异性地检测特异性关联抗原结合部分(特别是抗体)与其抗原的复合物的抗体及其片段。本公开的抗体并不单独与所述关联抗原结合部分或所述抗原结合，并因此可用于，例如直接检测结合抗原的抗原结合部分。进一步公开的是使用所述抗体和抗体片段的方法。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2012年8月20日提交的美国临时申请序列号61/684,836号的权益，其全部内容并入本文以供参考。

背景技术

制药产业对免疫球蛋白例如抗体有着持续并增长的兴趣。自2000年以来，单克隆抗体的治疗市场已呈指数增长，在2007年，在美国最畅销的20种生物技术药物中有8种为治疗性单克隆抗体，每一种在全世界都有超过50亿美元的年销售额。

目前，显著数量的抗体以及免疫球蛋白的衍生物和片段正处于临床前和临床研究阶段中。在进入人体之前，所研究的药物必须在广泛的探究和临床前试验中进行分析和表征。需要研究例如毒理学、药代动力学和药效动力学特征等重要指标，以建立安全且有效的药物信息(drug profile)。为了量化和监测治疗性抗体的水平，许多这类的研究需要使用药物特异性试剂，以在样品基质(sample matrix)例如病人或实验动物的血清或任意体液中特异地检测治疗性抗体。

药物特异性试剂包括，例如，仅检测人免疫球蛋白或人源化免疫球蛋白且因此其可用于对源自非人实验宿主的样品中的人治疗性抗体或人源化治疗性抗体进行定量的抗体(见例如WO2006066912；US序列号11/792,910，其全部内容并入本文以供参考)。进一步的是使用抗独特型抗体(anti-idiotypic antibodies)或抗体片段，其特异于治疗性抗体中的独特结构。因此，抗独特型抗体可用于检测样品基质中特定的治疗性抗体或抗体片段，而与样品所分离自的宿主无关(见，例如WO2009032128)。然而，因为绝大部分的抗独特型抗体结合至治疗性抗体的独特CDR的一个或多个，且所述的CDR定义了特异地与治疗性抗体的抗原相互作用的互补位(paratope)，所以只有对游离的、非与抗原结合的治疗性抗体的检测和监测是可能的。

US 2012/0157663描述了所谓的“domino抗体”，其具有仅当在抗体结合到各自的抗原上时才与所述抗体相结合的能力。US2012/0157663的抗体通过一种特定的基于杂交瘤的筛选技术产生。所有domino抗体的共同点是，靶抗体上的domino抗体的表位通过靶抗体与其各自的抗原相结合时所引起的构象变化形成。所述表位位于靶抗体的恒定区(例如轻链的恒定区)，且既不包括抗原的任何部分，也不包括所述靶抗体的CDR区。相比之下，本发明的复合物特异性抗体和抗体片段结合至靶抗体CDR区的至少某些部分。因此，尽管domino抗体仅在靶抗体结合其各自的抗原时识别靶抗体，domino抗体也与具有相同的抗原特异性的其它靶抗体相结合，即它们在这个方面是泛特异性的。相比之下，本发明的抗体和抗体片段特异于一种单一的靶抗体，且其仅在靶抗体结合其抗原时与此靶抗体结合。

因为应用到患者的治疗性抗体总是在宿主身体周围中的不同状态之间平衡，因此对于这些不同状态的监控和均衡化(proportion)为治疗性抗体的安全性提供了必须的信息。这些不同的状态根据质量作用定律平衡，包括总抗体、未结合抗体和结合抗体，且所述的平衡取决于，例如治疗性抗体的亲和性以及体内抗原的浓度。此外，由于治疗性抗体相对较慢的体内清除率，与其抗原相结合的治疗性抗体在长期的施用中通常导抗原水平的增加(Charles P.(1999)Journal of Immunology 163；1521-1528)。在治疗性抗体的存在下，结合的抗原被中和，且其大多数不具生物活性。然而，必须监测这种现象，并且例如评估突然停药的风险很重要。