[实用新型]高尔基体蛋白GP73定量测定试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种高尔基体蛋白GP73定量测定试剂盒，用于体外定量测定样品血清中的高尔基体蛋白GP73含量。

背景技术

肝癌发病率在全世界是位列第四位、中国位列第二的恶性肿瘤，且在世界范围内呈逐年上升趋势，现总发病率已超过56万。肝癌发病之初较为隐匿，临床难以检出，临床诊断检出一般多为晚期，治疗效果差，如若早期发现肝癌并且及时治疗可以提高患者的5年存活率，因此肝癌的早期发现具有重要的临床意义。

目前肝癌的检测手段包括肝超声影像分析和血清学标志物检测，其中最常使用的血清学标志物是甲胎蛋白（AFP），但是AFP在早期肝癌诊断中灵敏度不高，只有50％ ～60％的肝癌患者AFP呈阳性，并且慢性肝炎、肝硬化患者等肝癌高危人群也可引起甲胎蛋白的升高。因此，临床需要一种更好地用于肝癌监测的标志物。

近年来，随着基因组学、蛋白质组学、肿瘤免疫等相关研究的飞速发展，研究者筛选出一些潜在的新的肿瘤标志物，而高尔基体不但参与蛋白加工，还参与细胞分化及细胞间信号的转导，并在细胞凋亡中扮演重要角色，其功能障碍可能与肿瘤的发生密切相关，其中，高尔基体糖蛋白73（GP73）是最值得期待的血清标志物之一。已经有多个研究组验证了GP73是一种新的肝癌标志物。在以往的研究中多使用免疫印迹方法，这种方法不仅灵敏度低、特异性弱，在操作上也比较复杂，无法在临床上普及应用。经专利检索，GP73的检测方法有多种包括ELISA、基因诊断等多种形式，但尚未见有将板式磁颗粒化学发光免疫分析技术应用到高尔基体蛋白GP73的检测中。

发明内容

本实用新型的目的在于提供一种灵敏度高、特异性强、操作简单的高尔基体蛋白GP73板式磁颗粒化学发光免疫分析测定试剂盒。

本实用新型的目的是这样实现的： 

一种高尔基体蛋白GP73板式磁颗粒化学发光免疫分析测定试剂盒，包括盒体和盒体上方的盒盖，所述盒体内设有微孔板和位于盒体底部的支撑板，其中微孔板由48或96个微孔组成，支撑板上开有多个孔，所述孔内共放置有八个试剂瓶，所述八个试剂瓶内分别含有磁分离试剂、酶反应物、稳定增强剂、校准品、质控品、清洗浓缩液、稀释液以及底物溶液，其中磁分离试剂含有高尔基体蛋白GP73单克隆抗体包被的磁颗粒。

与现有技术相比，本实用新型的有益效果是：

本实用新型高尔基体蛋白GP73定量测定试剂盒具有较高的灵敏度和特异性，更短的获得检测结果的时间和更简便的操作方式，对肝癌的早期诊断具有重要意义。

附图说明

图1为本实用新型高尔基体蛋白GP73定量测定试剂盒的结构示意图。

图2为图1去掉盒盖和微孔板后的俯视图。

图3为图1中微孔板的结构示意图。

其中：

盒体1

盒盖2

支撑板3

孔4

试剂瓶5

微孔板6

微孔7。

具体实施方式

参见图1-图3，本实用新型高尔基体蛋白GP73定量测定试剂盒，包括盒体1和盒体上方的盒盖2，所述盒体1内设有微孔板6和位于盒体1底部的由泡沫塑料制成的支撑板3，其中微孔板6由48或96个微孔7组成，支撑板3上开有多个孔4，所述孔4内共放置有八个试剂瓶5，所述八个试剂瓶5内分别含有磁分离试剂、酶反应物、稳定增强剂、校准品、质控品、清洗浓缩液、稀释液以及底物溶液，其中磁分离试剂含有高尔基体蛋白GP73单克隆抗体包被的磁颗粒。

制备方法

步骤一、磁分离试剂的制备

一、磁珠缓冲液配制

1、称取TRIS 4.58g和NaCl6.81g于1L容器中，然后称取0.96g TWEEN-20于20ml容器中加适量水使其完全溶解后，再倒入上述1L容器中；

2、用移液器将 Proclin-300量取0.2ml于10ml纯化水的烧杯中完全溶解后，倒入上述1L容器中，然后在上述 1L容器中加入 800ml纯化水，充分搅拌；

3、调节PH计测量其 PH值，控制 PH在7.95-8.05之间；

4、称取BSA 3g倒入上述1L容器中；

5、最后1L容器定容至 1000ml，用0.2um滤器过滤；过滤完后贴好标签于2-8℃冷库贮存。

二、磁分离试剂的制备

1、将1.0mg辛二酸二琥珀酰亚胺酯溶于50ulDMSO中，取2mg抗GP73单克隆抗体溶于PH 9.5的0.1mol/L的PB缓冲液中至总体积为1ml；