[实用新型]一种检测泪液中乳铁蛋白的专用胶体金检测卡

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种检测泪液中乳铁蛋白的专用胶体金检测卡，是一种检测泪液中乳铁蛋白的检测器具，属于医用诊断试剂技术领域。 

背景技术

乳铁蛋白（lactoferrin，LF）是一种糖基化蛋白，属于铁结合蛋白家族，它能够可逆性地结合两个铁离子，它最早是从牛乳中分离出来，故而得名。人乳铁蛋白分子量约80kDa，等电点约为7.8，由692个氨基酸组成，存在于人体的多种体液和分泌液中如泪液、唾液、乳汁等。乳铁蛋白具有广谱的抗菌功能，主要是由于乳铁蛋白可以与铁离子结合，因而能竞争性抑制需铁的革兰氏阳性菌，此外还可与许多蛋白质和DNA结合发挥抗癌抗微生物的作用。乳铁蛋白具有广泛的抗病毒活性，作用的范围包括DNA病毒和RNA病毒，其对病毒的抗性表现在抵抗病毒对细胞表面的吸附作用上，直接和病毒或病毒的受体结合，从而消除病毒的入侵能力。此外，乳铁蛋白还具有抗癌细胞、抑制胆固醇积累、抑制脂质过氧化的功能。 

泪液中乳铁蛋白主要由泪腺分泌产生，与泪液溶菌酶、泪液前清蛋白以及少量分泌性免疫球蛋白和生长因子共同构成了泪液中蛋白的主要成分，保护眼表面不受外物入侵。角结膜干燥症又称干眼，是任何原因引起泪液质和量异常或动力学异常导致的泪膜稳定性下降，并伴有眼部不适，导致眼表组织病变为特征的多种疾病的总称，常见干眼病的症状有眼睛有干涩、灼痛感、眼屎较多；眼酸、眼痒、怕光和视力减退等。近年来干眼病的年轻化趋势明显，主要是由于现代生活中，青年人的工作和娱乐与电视、电脑接触得越来越多，长时间面对荧光屏，缺乏适时地眨眼或让眼睛休息，影响了双眼的泪液分泌。临床上诊断干眼病的检查包括泪液分泌实验、泪膜破裂时间、角结膜上皮染色、印记细胞学检查、溶菌酶含量检测、乳铁蛋白含量检测等。泪液乳铁蛋白的含量相对比较稳定，正常泪液中乳铁蛋白的含量在1.14~1.78g/L之间，重复性较好，如果泪液中乳铁蛋白含量低于0.9g/L，则可诊断为干眼病。 

泪液中乳铁蛋白的检测方法主要有分光光度法和高效液相色谱法等。分光光度法和高效液相色谱法操作简便，但需要检测的样品量比较大，而泪液标本的量非常少，因此不适用于泪液中乳铁蛋白的检测。本实用新型是一种基于乳铁蛋白具有抗原性的免疫学检测方法，采取免疫学竞争法的原理，结合胶体金标记技术和免疫层析法设计的一种快速检测试剂，可快速特异地检测泪液中的乳铁蛋白。根据检测卡样品检测线(T)和质控线(C)的有无显色来判定样品中的乳铁蛋白含量。本实用新型是利用乳铁蛋白抗原性而建立的一种检测工具，具有样品量少、特异性强的优点，同时检测卡操作简单快速，无需特殊的仪器设备，适合现场操作。 

实用新型内容

本实用新型目的是提供一种检测泪液乳铁蛋白的专用胶体金检测卡。 

本实用新型所提供的检测泪液中乳铁蛋白含量的专用胶体金检测卡（见附图），其为在长条扁平薄壳状的检测卡外壳1中设置测试条2，检测卡外壳表面有检测窗孔3和加样孔4；测试条2是由支承背板5上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫8、胶体金膜7、纤维素膜6、和吸水膜9所组成；支承背板中部叠置粘贴纤维素膜6，支承背板一端叠置粘贴吸水膜9，支承背板另一端叠置粘贴样品垫8，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与纤维素膜搭接，在样品垫与纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金膜7；胶体金膜为含抗乳铁蛋白抗体胶体金标记的玻璃纤维膜，纤维素膜上有一条检测带和一条质控带，依次是：含乳铁蛋白的检测带10，含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带11，测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，纤维素膜正对检测窗孔。 

所述的支承背板5为不吸水的韧性材料。 

所述的韧性材料用硬质塑胶条或不吸水硬纸条制成。 

所述的样品垫8为玻璃纤维膜，或尼龙膜、聚偏二氟乙烯膜、聚酯膜。 

胶体金膜7的结合垫也为玻璃纤维膜，或尼龙膜、聚偏二氟乙烯膜、聚酯膜。 

所述的纤维素膜6为硝酸纤维素膜，或羧化纤维素膜。 

所述的吸水膜9为吸水能力较强的吸水滤纸或滤油纸。 

所述的乳铁蛋白金标抗体为胶体金标记的乳铁蛋白单克隆抗体。 

本实用新型所提供的胶体金检测卡检测泪液中乳铁蛋白含量的方法，包括以下步骤： 

（1）样品处理

新鲜泪液样品可直接用于检测，冷冻或冷藏泪液样品需复温至室温进行检测。

（2）利用上述胶体金检测卡检测样品中乳铁蛋白