[发明专利]一种重组腺病毒rAd-ORF2-TCE及其应用无效
| 申请号： | 201310754470.2 | 申请日： | 2013-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN103805573A | 公开（公告）日： | 2014-05-21 |
| 发明（设计）人： | 罗满林;陈瑞爱;莫永正;高娟 | 申请（专利权）人： | 广东大华农动物保健品股份有限公司;肇庆大华农生物药品有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;A61K48/00;A61K39/125;A61P31/20;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人： | 汤喜友 |
| 地址： | 527400 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 病毒 rad orf2 tce 及其 应用 | ||
1.一种重组腺病毒rAd-ORF2-TCE，其特征在于，其是将PCV2的免疫原性蛋白基因ORF2与三个T细胞表位串联基因TCE融合连接后重组至腺病毒载体获得的。
2.如权利要求1所述的重组腺病毒rAd-ORF2-TCE，其特征在于，所述ORF2基因以细胞培养物中抽提的PCV2基因组DNA作模板，PCR扩增获得；所述TCE基因是参照GeneBank发表的PCV2基因序列，以人工化学法合成。
3.如权利要求2所述的重组腺病毒rAd-ORF2-TCE，其特征在于，所述ORF2基因和TCE基因分别克隆到pMD18-T Simple Vector中并进行鉴定。
4.如权利要求3所述的重组腺病毒rAd-ORF2-TCE，其特征在于，其是采用重叠延伸PCR法将ORF2基因与TCE基因通过疏水甘氨酸接头进行PCR扩增融合，得到如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，再重组至腺病毒载体获得的。
5.如权利要求4所述的重组腺病毒rAd-ORF2-TCE，其特征在于，重组腺病毒rAd-ORF2-TCE获得过程中，SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经限制性内切酶消化后定向克隆至pShuttle-CMV，获得重组腺病毒转移载体pShuttle-CMV-ORF2-TCE。
6.如权利要求5所述的重组腺病毒rAd-ORF2-TCE，其特征在于，重组腺病毒获得过程中，将获得的转移载体pShuttle-CMV- ORF2-TCE经线性化后，转化携带腺病毒载体骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183感受态细胞，再抽提同源重组质粒，转化DH5a感受态细胞，再抽提无内毒素同源重组质粒，线性化后在脂质体介导下转染AD293细胞即得所述重组腺病毒rAd-ORF2-TCE。
7.如权利要求6所述的重组腺病毒rAd-ORF2-TCE，其特征在于，所述重组腺病毒rAd-ORF2-TCE经过至少3轮噬斑纯化。
8.权利要求1-7任一项所述的重组腺病毒rAd-ORF2-TCE在猪病毒性免疫疫苗中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于广东大华农动物保健品股份有限公司;肇庆大华农生物药品有限公司，未经广东大华农动物保健品股份有限公司;肇庆大华农生物药品有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310754470.2/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
