[发明专利]一种石榴皮中降糖活性总三萜酸的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种石榴皮中具有降糖活性的总三萜酸的提取方法，属于天然产物提取技术领域。

背景技术

石榴是一种具有较高营养价值和保健功能的药食两用资源，有 “全身是宝” 的美称。目前我国已成为是世界上第一大石榴种植国，但我国石榴加工产业仍停留在较为粗放的阶段，深加工技术水平与产品转化效率均较低。石榴皮是石榴加工过程中最主要副产品 (占石榴果实20～30 %)，一般作为废弃物处理，造成资源的严重浪费。目前从石榴皮中鉴定出来的化合物主要有黄酮类、生物碱类、鞣质类、有机酸类等，石榴皮中三萜酸成分的报道较少，只有关于齐墩果酸与熊果酸的报道。三萜酸是五环三萜类化合物，一般分为羽扁豆烷型、齐墩果烷型、熊果烷型等结构类型，在植物界广泛存在。

近年来国内外研究发现三萜酸类成分大多都具有很好的降糖生物活性。三萜酸类化合物由于结构复杂，人工合成困难，目前均从天然植物中提取获得，寻找富含三萜酸的植物来源也日益受到关注。如果能从石榴皮中提取出总三萜酸成分，不仅能很好的利用石榴皮副产品，防止资源的浪费，还大大降低了成本，对石榴资源的有效利用及深层次产品加工与开发具有重要意义。目前还没有关于石榴皮中三萜酸的提取方法公开，虽然有其他植物中总三萜酸的提取方法报道，但这些提取总三萜酸的工艺成本高，流程长，操作复杂，三萜酸提取杂质多、纯度低，并且采用石油醚、乙酸乙酯等有机溶剂, 这些提取溶剂有毒且成本高不适于工业化生产；此外，不同样品材料所含三萜酸种类及样品中杂质也有很大差异性，因此在样品前处理及除杂过程中要有针对性的选择合适的处理方法对样品进行处理，所以不同的原料前处理方法不能通用，因此要从石榴皮中提取出总三萜酸需要创造性的研究。

发明内容

本发明的目的是提供一种石榴皮中降糖活性总三萜酸的提取方法，该方法以石榴皮为原料，变废为宝，成本低，整个过程简单、不使用有毒溶剂，符合环保要求。

本发明通过大量的试验研究，得到了石榴皮中总三萜酸的提取方法，该方法以石榴加工副产品-石榴皮为原料，采用乙醇提取、活性碳脱色、酸沉碱洗及大孔吸附树脂纯化的工艺路线，工艺简单、成本低、所得产品纯度高。

本发明具体技术方案如下：

一种石榴皮中降糖活性总三萜酸的提取方法，其特征是包括以下步骤：

（1）将石榴皮用无水乙醇超声提取，得提取液；

（2）将提取液浓缩成浸膏，用80-90体积%的乙醇溶液溶解滤去不溶物；

（3）滤去不溶物的乙醇溶液上活性炭柱，用80-90体积%的乙醇溶液进行洗脱；

（4）将洗脱液用酸沉淀，所得沉淀用碱洗后取滤液，滤液浓缩成浸膏；

（5）将浸膏用70-95体积%的乙醇溶液溶解，调节pH至中性后用大孔吸附树脂纯化，然后用70-95体积%的乙醇溶液洗脱，减压回收乙醇和水，得总三萜酸。

上述提取方法中，为了有效成分的充分提取，将原料石榴皮干燥、粉碎。

上述提取方法中，超声提取石榴皮时，无水乙醇的用量为石榴皮质量的20-50倍，优选为35倍。

上述提取方法中，提取温度为60-70℃，超声时间为20-40 min。

上述提取方法中，超声功率为300W，频率为25KHz。

上述提取方法中，步骤（2）中，80-90体积%的乙醇溶液的质量为浸膏质量的10-30倍，优选为15倍。

上述提取方法中，步骤(3)中，活性炭与石榴皮的质量比为1-10: 1，优选为3-5：1。

上述提取方法中，步骤(3)中，80-90体积%的乙醇溶液的质量为活性炭质量的10-20倍，优选为15倍。

上述提取方法中，步骤（4）中，所述酸为浓盐酸，所述碱为1-2 wt%的氢氧化钠溶液。

上述提取方法中，步骤(4)中，按照每升洗脱液中加入25-35 mL酸的量向乙醇洗脱液中加入酸，加入后静置2-3 h进行酸沉，优选每升洗脱液中加入30 mL酸。

上述提取方法中，步骤(4)中，向沉淀中加入其质量4-6倍的碱，煮沸后过滤。

上述提取方法中，步骤（5）中，用浓盐酸调节pH至中性。

上述提取方法中，步骤（5）中，所述大孔吸附树脂为HPD100大孔吸附树脂或者D101大孔吸附树脂。

上述提取方法中，步骤（5）中，所述大孔吸附树脂与石榴皮的质量比为0.5-1.5: 3，优选1:3。