[发明专利]一种检测人热休克蛋白(Hsp90α)的生物芯片及其检测方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种检测抗原的生物芯片和检测方法，具体涉及一种人热休克蛋白(Hsp90α)的生物芯片及其检测方法。

背景技术：

生物芯片一般指高密度固定在互相支持介质上的生物信息分子(如基因片段、DNA片段或多肽、蛋白质、糖分子、组织等)的微阵列杂交型芯片(micro-arrays)，阵列中每个分子的序列及位置都是已知的，并且是预先设定好的序列点阵。

根据与生物分子的系统化程度，生物芯片可以分为DNA芯片、RNA(核糖核酸)芯片、蛋白质芯片、细胞芯片和神经元芯片。此外，根据生物分子的检测方式，生物芯片可大致分为两种类型，第一种为微阵列类型，其利用捕获探针(capturing probe)探索包含于样品中的特定的生化物质。具体地，将能够用作捕获探针(capturing probe)的物质固定在芯片的表面，然后，与需要分析的生化物质进行反应后，通过检测及分析有无反应，可以获得生化物质的信息。第二种为利用微流体的生物芯片，在芯片上设置微通道、微室和混合阀，以控制微流体，将生化物质固定在检测单元后，利用微流体使需要检测的生化物质与固定在检测单元的生化物质进行反应，以检测有无反应。从长远来看，且根据最近的小型化趋势，这是研究最活跃的领域。

制造和利用生物芯片需要能够与反应物质反应的探针的固定技术、能够检测有无反应的检测技术、及能够处理检测到的信息的信息处理技术。

其中，能够检测有无反应的检测技术一般使用诸如荧光、比色和同位素等特定方式的标记。这种标记技术对提高检测灵敏度非常重要。但是，存在的问题是，标记可能会使生物分子变形，或低分子物质无法被标记。还存在的问题是，标记过程消耗大量的样品，并且需要进行2-3个更多的步骤，对于蛋白质而言，各种蛋白质之间的标记差异增加了量化误差。目前，具有代表性的标记方式是激光诱导荧光检测方法。激光诱导荧光检测方法是目前最流行的光学方法，其中，利用荧光物质标记样品，利用标记的荧光物质检测与固定在基板上的探针间有无反应。然而，这种方法还存在的问题是，为了检测有无反应，需要光学测量系统，这造成需要很多时间和成本，而且，这种检测方法还在基于生物芯片的分析系统。

人热休克蛋白90α，即Hsp90α，是热休克蛋白家族中的重要成员。1989年国外专家首次报道了Hsp90α的基因序列，确认了该蛋白的身份。1992年外国科学家发现，Hsp90α能被肿瘤细胞分泌到细胞外，但其分泌调控机制在此后很长时间里并不清楚。

Hsp90α这一全新肿瘤标志物的目前已得到确认，同时揭开了细胞外Hsp90α与细胞内Hsp90α的分子差异，进一步说明了分泌型Hsp90α能促进肿瘤侵袭及转移，且其在血液中的含量与肿瘤恶性程度正相关。这些发现证明了血液中Hsp90α作为肿瘤标志物的良好潜质。Hsp90α肿瘤标志物具有广谱的特性，可用于肝癌、乳腺癌、结直肠癌等多个瘤种的临床检测，可实时准确地反映治疗效果。Hsp90α作为肿瘤标志物，检查更方便快捷，成本也大大降低。只需取一滴血，即可通过这种试剂盒检测血浆中Hsp90α的含量。有些肿瘤患者尽管并未表现出相关症状，但其Hsp90α含量可能已经升高，如果先检测Hsp90α在血液中水平，再进行深入检查，就可能被确诊为肿瘤，这能使患者早日接受治疗，从而大大提高治愈率或延长生存期。

此外，患者血浆中Hsp90α含量的高低与病情变化有较好的对应性，因此可实时、较准确地反映治疗效果，为医生制定和及时调整治疗方案提供参考。

发明内容：

本发明的目的是提供一种检测人热休克蛋白(Hsp90α)的生物芯片及其检测方法，每个膜块可同时检测80个血液样品，利用橡胶分隔片和玻片固定夹，可在一张芯片上有16个膜块，操作简便、节省样本和时间，可自动进行标准化校正，并生成各自身抗体信号强度的图表。

本发明采用以下技术方案：它的检测装置是由玻片、橡胶分隔片和金属固定夹组成，橡胶分隔片设置在玻片上方，两侧分别插入金属固定夹的凹槽中，将芯片和橡胶分隔片固定在一起。