[发明专利]紫花苜蓿逆境响应基因MsNAC2及其应用

权利要求书

1.一种紫花苜蓿逆境响应基因，其为MsNAC2，具有：

1）SEQ ID No.11所示的核苷酸序列；或

2）SEQ ID No.11所示核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或几个核苷酸；或

3）在严格条件下与1）限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。

2.含有权利要求1所述基因的表达载体。

3.如权利要求2所述的表达载体，其为pBIGFP-MsNAC2。

4.含有权利要求2或3所述载体的宿主细胞。

5.权利要求1所述的基因在制备转基因植物中的应用。

6.权利要求1所述的基因在提高植物抗逆性方面的应用。

7.克隆权利要求1所述紫花苜蓿逆境响应基因MsNAC2的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）利用RT-PCR方法从紫花苜蓿基因组中扩增获得NAC的保守区片段序列；

（2）根据步骤（1）的保守区序列设计3′RACE引物，然后以紫花苜蓿总RNA为模板，进行3′RACE片段扩增；

（3）设计5′RACE引物扩增5′RACE片段；

（4）用软件将保守区序列，3′RACE片段和5′RACE片段拼接成完整的全基因序列，得到紫花苜蓿逆境响应基因MsNAC2。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤（1）的RT-PCR方法中，所用引物序列中上游引物序列如SEQ ID NO.1所示，下游序列如SEQ ID NO.2所示。

9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤（2）的3′RACE引物序列如SEQ ID NO.3所示。

10.如权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤（3）的5′RACE引物序列如SEQ ID NO.4所示。