[发明专利]重组的人乳头瘤病毒16型L1蛋白及其用途

说明书

本发明为重组的人乳头瘤病毒16型L1蛋白及其用途，提供一种新的编码重组的HPV16 L1蛋白的多核苷酸基因片段、包含该基因片段的载体、包括载体的宿主细胞，以及由该基因片段翻译表达的HPV16 L1蛋白五聚体和由该五聚体组成的抗HPV16型感染的宫颈癌疫苗。

技术领域

本发明涉及人类乳头状瘤病毒感染的预防和/或治疗。更具体而言，本发明涉及一种重组的人乳头瘤病毒16型L1蛋白，及由其组成的五聚体，含该蛋白的疫苗及其在预防HPV16型病毒感染，特别是在预防HPV16型病毒感染引起的宫颈癌疾病中的用途。

背景技术

人类乳头状瘤病毒(Human Papillomavirus,简称HPV)是通过密切接触而传播的DNA病毒。在人体组织中,HPV主要感染皮肤和黏膜组织。HPV可分为高危险型和低危险型两种，长期持续感染高危型可以致癌，如宫颈癌，危害生命。低危型HPV可导致生殖器病变，如尖锐湿疣，影响生活质量。宫颈癌是女性第二大恶性肿瘤,每年全球的发病大概在54万(2013年),约有24万例死亡,幸运的是,宫颈癌是唯一研制出疫苗的癌症。2006 年6月8日,美国食品与药品管理局(FDA)正式批准美国Merck公司(即默沙东公司)生产的 GardasilHPV 预防性疫苗上市；它是由酿酒酵母表达并纯化的HPV16/18/6/11 L1 VLP 四价宫颈癌预防性疫苗，被批准用于预防 6~ 26岁女孩和妇女 HPV16、18、6、11型感染所引起的宫颈癌、癌前病变和生殖器疣，这是FDA通过的世界上第一个肿瘤疫苗(Villa, Costa et al.2005, Villa, Ault et al. 2006, Bryan 2007, Olsson, Villa et al. 2007,Goldstone and Vuocolo 2012)。随后英国葛兰素史克(GSK)公司生产的商品名为Cervarix的 HPV 预防性疫苗也成功上市，它是由来源于昆虫表达系统的 HPV16/18 L1 VLP 二价宫颈癌预防性疫苗。但这两种预防性疫苗价格昂贵，极大限制了在发展中国家和落后地区的使用，因此开发一种低成本的高效价HPV疫苗就显得尤为重要(Jansen and Shaw 2004,Buonaguro, Tornesello et al. 2009, Campo and Roden 2010, Frazer, Leggatt etal. 2011, Hariri, Dunne et al. 2011, Lehtinen and Dillner 2013, Shaw 2013)。

HPV属乳头多瘤空泡病毒科(Papovaviridae)乳头瘤病毒属，为无包膜DNA病毒。病毒基因组为双链闭环DNA，大小约为7.2～8kb，具有8个开放框。基因组按功能的不同可以分为三个区域：早期区(E)，约4. 5kb，编码E1、E2、E4～E7共6个与病毒复制，转录及转化有关的非结构蛋白；晚期区(L)，约2. 5kb，编码主要衣壳蛋白L1和次要衣壳蛋白L2；长调控区(LCR)，位于L区末端与E区起始端之间，长约800～900bp，不编码任何蛋白，含DNA复制、表达调控元件。