[发明专利]一种稳定的含菠萝蛋白酶的凝胶

说明书

技术领域

本发明涉及一种的含菠萝蛋白酶的凝胶，具有在良好的稳定性，使用方便，作用迅速的特点，同时具有抑菌作用，用于蛋白变性修复、抗炎、止痛、增加抗生素效果，属于医药技术领域。

背景技术

菠萝蛋白酶（Bromelain，简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤梨酵素）是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。其外观为浅灰色粉末状，分子量为33000，等电点为9.55，最适pH值：6～8。溶于水，不溶于乙醇、氯仿和乙醚。属糖蛋白。主要作用原理：使多肽类水解为低分子量的肽类。尚有水解酰胺基键和酯类的作用。主要的医药用途包括可抑制肿瘤细胞的生长；对心血管疾病的防治是有益的。它能抑制血小板聚集引起的心脏病发作和中风，缓解心绞痛症状，缓和动脉收缩，加速纤维蛋白原的分解。能选择性地除皮，使新皮移植得以尽早进行。动物实验证明，菠萝蛋白酶对邻近的正常皮肤无不良影响。菠萝蛋白酶在各种组织中能有效地治疗炎症和水肿(包括血栓静脉炎、骨骼肌损伤、血肿、口腔炎、糖尿病人溃疡及运动损伤)。将菠萝蛋白酶与各种抗生素（如四环素，阿莫西林等）联用，能提高其疗效。相关研究表明，它能促进抗生素在感染部位的传输，从而减少抗生素的用药量。据推断，对于抗癌药物，也有类似的作用。此外，菠萝蛋白酶能促进营养物质的吸收。另外，菠萝蛋白酶还具有嫩肤、美白去斑的优异功效。基本作用原理：菠萝蛋白酶可作用于人体皮肤上的老化角质层，促使其退化、分解、去除，促进皮肤新陈代谢，减少因日晒引起的皮肤色深现象。使皮肤保养呈现良好白嫩状态。

在干燥或低湿的环境下，菠萝蛋白酶的失活发生在保存的前期，到后期趋于平稳，这是由于保存初期酶的湿度大于环境湿度，较高的水分赋予酶结构一定的柔性，酶活性中心的构象易发生变化。当酶与干燥环境达到平衡后，酶的水分减少，酶活趋于稳定。同时，在高湿环境下，酶活一直下降，其原因除了高水分增加了酶结构的柔性外，更重要的是由于蛋白酶的自水解作用。

但是由于药用菠萝蛋白酶原料的对高湿和温度敏感，在水溶液或水分较多的状态下很快降解失活，使其提供的剂型仅限于胶囊、粉剂等，需要临用前用溶剂调制，使用不便。

水凝胶是一种能够在水中溶胀并保持大量水而又并不溶解的亲水性聚合物，通过共价键、氢键或范德华力等作用相互交联构成三维网状结构。由于有大量的水分充斥于水凝胶聚合物网络中，因此整个材料具有了流体的性质，这与机体组织（含有大量水溶液）非常相似，湿润、柔软的表面还有与组织的亲和力大大减少了材料对机体组织的刺激，使得水凝胶的生物相容性比其他材料要好。另外，高分子水凝胶的网状结构还可以保护药物不被酶解或被胃酸破坏。根据水凝胶对外界刺激的响应情况可将其分为两大类：传统水凝胶（普通水凝胶）和智能水凝胶（环境敏感水凝胶）。前者对环境的变化不敏感，而后者对于外界微小的物理化学刺激，如温度、电场、磁场、光、pH、离子强度和压力等能够感知、处理并产生应答，表现为体积、形态等的显著变化。

温敏水凝胶是一类响应温度变化的智能材料，由亲水性聚合物形成的网络结构，当温度超过低临界溶液温度（LCST）时，体系发生溶液-凝胶转变；当温度超过高临界溶液温度（UCST）时，体系发生凝胶-溶液转变；反相温敏凝胶材料的特征是，低温下为液态,高温时转变成固态或半固态的凝胶。其优越性能正是在于其相变的特性。在体外是液态，用于生物体或体表，在局部形成一定机械强度的凝胶，控制药物缓慢释放。由于在体外为不定型的液体，在给药后可以随给药部位不同形成各种形状，特别是用于局部的体表使用时，达到无死角给药，而后形成均匀的附着凝胶层，更好的发挥药效，并有一定的屏蔽作用。

由于菠萝蛋白酶具有局部用药的潜质，为得到一种菠萝蛋白酶的局部用药，本发明进行了有关研究，发现使用水凝胶制剂可以解决菠萝蛋白酶在液体或半固体状态下的稳定性问题，为此本发明提供了一种稳定性良好的，使用方便的菠萝蛋白酶温敏性凝胶制剂。无需调剂，可直接涂抹于病患部位，作用迅速。

发明内容

本发明所提供一种含菠萝蛋白酶的水凝胶制剂，含有作为活性成分的菠萝蛋白酶和药学上可接受的载体；

本发明的水凝胶制剂，其中所述菠萝蛋白酶为经过提纯步骤获得的精制蛋白水解酶。其水解酶活力为每克15-18万单位；蛋白含量为16-20%。

其中所述精制蛋白水解酶的制备方法如下：