[发明专利]一种苦参碱的提取方法

说明书

技术领域

本发明属于医药加工生产领域，涉及一种苦参碱的提取方法，尤其是从山豆根中提取苦参碱。

背景技术

苦参碱来源于山豆根、苦参、苦豆子等植物，是一类具有抗肿瘤、抗菌和抗病毒等多种药理作用与功效的生物碱。由于苦参碱作为抗癌药物而具有重大的开发价值，近年来备受关注。

分子印迹技术是目前研究的热点，是一种比较具有产业化价值的技术。目前，全世界至少有包括瑞典、日本、德国、美国、中国、澳大利亚、法国在内的几十个国家、上百个学术机构和企事业团体在从事分子印迹聚合物（molecular imprinting polymers, MIPs）的研究和开发，发展如此迅速，主要因为它具有构效预定性、特异识别性的特点，分子印迹技术一般是将目标分子作为模板分子，选择在官能团结构上与之相匹配的功能单体，让两者间发生共价作用或非共价作用，再加入交联剂通过热聚合或光聚合，在引发剂的致孔剂的诱发下产生聚合反应，从而形成包裹有目标分子的高聚物，即分子印迹聚合物（MIPs），随后，利用物理或者化学方法，将目标分子从聚合物内部洗脱出来，以此获得具有与目标分子形状相同且官能团位置一定的记忆空穴。

目前苦参碱的生产工艺主要是溶剂提取法，其工艺繁琐，收率低，污染严重。超声波提取（也称为超声波萃取）以其提取温度低、提取率高、提取时间短的独特优势被应用于中药材和各种动、植物有效成分的提取，是替代传统工艺方法实现高效、节能、环保式提取的现代高新技术手段。关于超声提取苦参碱的报道，目前只涉及相关参数的调整，如超声功率、频率、溶剂和时间等。

发明内容

本发明的目的在于克服上述技术问题，提供一种从山豆根或苦参中提取苦参碱的方法。

本发明的目的是通过如下技术方案实现：

一种苦参碱的提取方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）苦参碱分子印迹的制备：

将1~1.5mmol苦参碱与6mmol甲基丙烯酸溶解在5~10ml氯仿中，置于0℃下保持30min，然后加入15~30mmol二甲基丙烯酸乙二醇酯与15~30mmol N-异丙基丙烯酰胺和40~100mg偶氮二异丁腈，混合后，通入氮气，搅拌至完全溶解，通氮气10min，封口，在65℃条件反应直至聚合完全，粉碎，过200目筛，用甲醇：乙酸（9：1）洗脱苦参碱，装载固相萃取柱；

（2）苦参碱溶液的提取：

将山豆根或苦参药材以水作为提取媒介，超声提取，再将提取液过50nm超滤膜；

（3）苦参碱分子印迹固相萃取柱对苦参碱的提取分离：

将过膜后的提取液加热至50℃，加载在固相萃取柱上，先用50℃水洗脱杂质，再用25℃水洗脱苦参碱。

本发明还可以用5%亚硫酸氢钠溶液作为提取媒介，可将药材中氧化苦参碱（OMT）、氧化槐果碱（OSC）及槐果碱（SC）还原为苦参碱（MT），从而提高收率，见图1。色谱条件：岛津LC-20A，LC-20AT泵，SPD-20A检测器，SIL-20进样器；LCsoluton色谱工作站；检测波长为220nm；色谱柱：GL Sciences Inertsil ODS-SP 5μm 4.6×250mm；流动相条件：甲醇：乙腈：乙醇：0.1%磷酸溶液（42：36：10：12）。

本发明将提取液用50nm超滤膜处理，可将大部分杂质去除的同时对苦参碱的损失较少，见图2 ；含苦参碱123.94g的提取液20L，通过50nm陶瓷膜后，回收120.36g ，收率为97.11%。膜分离设备：型号 TGMF 1904-1-3，厦门市天泉鑫膜科技有限公司；流动相条件：异丙醇:乙腈:0.1%磷酸（74:18:8）为流动相；检测波长为210nm。

本发明制备的苦参碱分子印迹材料，先用热水（38℃以上）洗脱吸附在分子印迹上的杂质，再用冷水（低于38℃）是聚合物发生容张，从而对于苦参碱的特异性吸附转变为非特异性吸附，利于苦参碱的解吸。8mmol/L浓度下25℃和50℃时，分子印迹聚合物对苦参碱的吸附量见图3。

本发明公开的一种苦参碱的提取方法，工艺绿色环保，没有用到任何有机试剂，利用膜分离设备去除杂质后，通过分子印迹SPE柱，调节洗脱剂温度，即可获得纯度较高的苦参碱水溶液。

附图说明

图1  水和5%亚硫酸氢钠溶液作为提取媒介对比液相色谱图

图2  超滤前后对比液相色谱图

图3  8mmol/L浓度下25℃和50℃时，分子印迹聚合物对苦参碱的吸附量

图4  分子印迹SPE柱洗脱色谱图

具体实施方式