[发明专利]一种提取玻璃酸酶精品的方法

权利要求书

1.一种提取玻璃酸酶精品的方法，其特征在于，粗品经色谱分离、热原处理、冻干得玻璃酸酶精品，所述玻璃酸酶精品的效价可以达到350iu/mg。

2.权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(一)色谱分离

设定柱流速25L/h，用平衡液平衡色谱分离柱2小时，粗品溶于少量平衡液后上柱，再分别用平衡液和清洗液各清洗柱子25分钟，然后用洗脱液洗脱30分钟，收集溶液，加4倍收集液体积的乙醇沉淀12小时后离心脱水，转速3700r/min；其中：平衡液为醋酸钠1090g，加纯化水160L，调pH3.6后的溶液；清洗液为醋酸钠220g，加纯化水16L，调pH3.6后的溶液；洗脱液为氯化钠440g，加纯化水15L，调pH3.6后的溶液；

(二)热原处理：

将上述溶液离心，过滤，将滤液放冰浴中冷却，加入15％磷酸三钠(Na₃PO₄·12H₂O)溶液，在不断搅拌下，缓缓加入20％醋酸钙(Ca(CH₃COO)₂·H₂O)溶液，并以NaOH溶液调pH8.5，离心，收集上清液，之后上清液调pH6.5～7.0；

(三)冻干

将滤液冷冻干燥，即得无热原的玻璃酸酶精品。

3.权利要求书2所述的方法，其特征在于，在步骤(一)中，色谱柱流速为25L/h。

4.权利要求书2所述的方法，其特征在于，在步骤(一)中，得到收集液后，要加4倍收集液体积的乙醇沉淀12小时后再离心脱水，其转速为3700r/min。

5.权利要求书2所述的方法，其特征在于，在步骤(一)中，平衡液为醋酸钠1090g，加纯化水160L，调pH3.6后的溶液。

6.权利要求书2所述的方法，其特征在于，在步骤(一)中，清洗液为醋酸钠220g，加纯化水16L，调pH3.6后的溶液。

7.权利要求书2所述的方法，其特征在于，在步骤(一)中，洗脱液为氯化钠440g，加纯化水15L，调pH3.6后的溶液。

8.权利要求书2所述的方法，其特征在于，步骤(二)中的“上述溶液”在过滤前以及调pH值至8-9后都要进行离心，离心时间：20分钟～30分钟，转速：2700～3200r/min。