[发明专利]一种能够抑制土传病害的秸秆腐熟剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明专利涉及一种能够抑制土传病害的秸秆腐熟剂及其制备方法，属于农业微生物应用技术领域。

背景技术

我国秸秆年产量约10亿吨，秸秆主要成分为纤维素类多糖，其次还含有氮、磷、钾等植物所需的元素。秸秆腐烂之后能增加土壤有机质和土壤不同粒级团聚体数量，从而增加土壤通透性和持水能力，减少土壤板结；纤维素分解可以为微生物繁殖提供能源，从而增加土壤微生物数量及多样性，增加土壤有机物转化、能量转移的能力，提升土壤质量。

随着农村劳动力向城市的大量转移和农业机械化程度的提高，水稻和小麦等主要农作物的机械收割比例越来越高，机械收割之后有大量秸秆滞留农田。秸秆滞留农田，严重影响当季作物的种植，如麦杆影响下一季水稻苗的定植，即使栽种下水稻苗也容易“漂秧”，使水稻秧苗集中于田间部分位置，造成田间秧苗密度分布不均，影响水稻产量。同样，水稻或者麦子的秸秆容易缠绕翻地旋耕机械，影响土壤耕作，同时秸秆容易造成表层土壤空隙过大，土壤极易失水，影响麦子出苗。秸秆是很多病原菌的附着体和病害传播的媒介，尤其土传类病害，如引起水稻和小麦纹枯病的立枯丝核菌能够形成菌核附着在秸秆残体上长期存活，一旦条件成熟就能够萌发感染植株。

农村处理秸杆问题的常见方法多采用原地焚烧，这种处理方式不仅造成大量的资源浪费，而且引起很严重的空气污染。采用秸秆腐熟剂加速秸秆腐烂，有效的遏制焚烧现象。但很多腐熟剂不能够抑制病原菌，种植户因担心病害的传播，会将秸秆从农田搬出堆置在田头，秸秆腐烂后大量的污水随着农田排水和自然降水进入自然水体造成水体污染。

针对以上问题，本发明采用具有高效降解秸秆能力的微生物菌株和高效抑制土传病害的生物防治菌株制作秸秆腐熟剂，该腐熟剂在分解秸秆的过程中可以繁殖大量的生物防治菌株，有效的抑制土传病原菌的萌发。

发明内容

本发明专利的目的在于提供一种抑制土传病害秸秆腐熟剂的制备方法，包括如下步骤：

步骤一，构巢曲霉固体吸附菌剂的制备，

首先制备PDA培养液，以配制1L培养基计，用200g土豆削皮后切成小块放到水里煮，沸腾后煮30min，用纱布过滤后，滤液加20g普通蔗糖，定容至1000ml，121℃灭菌20min既得。

将构巢曲霉接种到PDA培养液中，进行液体发酵生产，其发酵生产的条件为：初始pH自然，培养温度为25℃，溶氧，所述溶氧的通气量范围为30～100％，170rpm，发酵中后期形成菌丝片段，发酵液菌株的菌落形成单位≥1×10⁷cfu ml^-1。构巢曲霉的发酵液按照40％(v：w)加入麦麸，最后采用真空干燥机干燥至含水量低于5％，粉碎机粉碎成菌种粉，制得构巢曲霉固体吸附菌剂，低温保存备用。

步骤二，米曲霉固体吸附菌剂的制备，

首先PDA培养液配制，以配制1L培养基计，用200g土豆削皮后切成小块放到水里煮，沸腾后煮30min，用纱布过滤后，滤液加20g普通蔗糖，定容至1000ml，121℃灭菌20min，既得。

将米曲霉接种到PDA培养液中，进行液体发酵生产，其发酵生产的条件为：培养温度28℃，溶氧，所述溶氧的通气量范围为40～90％，120-180rpm，发酵中后期形成菌丝片段，发酵液菌株的菌落形成单位≥1×10⁷cfu ml^-1。米曲霉发酵液按照40％(v：w)加入麦麸，真空干燥机干燥至含水量低于5％，粉碎机粉碎成菌种粉，制得米曲霉固体吸附菌剂，低温保存备用。

步骤三，枯草芽孢杆菌固体吸附菌剂的制备

首先液体种子培养基和液体发酵培养基采用牛肉膏蛋白胨培养基，其配方为，以配置1L培养基计：采用牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl10g，自来水1000ml，混合，121℃灭菌20min既得。

将枯草芽孢杆菌接种到液体种子培养基培养，所述的培养条件为：培养温度37℃，摇床转速150rpm，培养时间24小时，种子含菌量大于1×10⁹cfu ml^-1，制得种子，