[发明专利]抗真菌性防御素的用途

说明书

领域

本公开内容涉及保护植物免于病原体。本公开内容使得使用防御素（defensin）作为抗病原性真菌的剂成为可能。

背景

在本说明书中作者所引用的出版物的著录细节被按字母排序汇总在说明书结尾。

在本说明书中引用任何现有技术不得且不应被视作承认或以任何形式表明该现有技术形成在任何国家的公知常识的一部分。

真菌病原体具有毁坏作物导致重大经济损失的可能。大约300,000个开花植物物种全部对植物致病性真菌易感。此类病原体往往局限于某些植物物种或类型。尽管传统选择育种已在开发对植物病原体具有抗性的植物栽培种中成功，这种抗性一般局限于选定的病原体的物种或菌株且开发时间太漫长以致不能应对流行病的突然开始。

开发具有期望特性的植物的分子途径提供了加强产生表达这些性状的栽培种的开发时间的手段。

对使用这些技术开发对植物致病性真菌具有抗性的植物和开发抗植物致病性真菌的局部组合物（topical composition）存在需要。

概述

贯穿本说明书，除非上下文另外要求，否则词“包括（comprise）”或变化形式如“包括（comprises）”或“包括（comprising）”将被理解为暗示包含叙述的要素或整体（integer）或方法步骤或者要素或整体或方法步骤的组但不排除任何要素或整体或方法步骤或者要素或整体或方法步骤的组。

如在本说明书中所用的，单数形式“一种（a）”、“一种（an）”和“该（the）”包括单数和复数方面，除非上下文另外清楚地指明。因此，例如，提到“一种防御素”包括一种单一的防御素，和两种或更多种不同的防御素；提到“一种剂”包括一种单一的剂，和两种或更多种剂；提到“本发明”包括被本公开内容教导的一个或多个方面。本文公开的方面被术语“发明”涵盖。使本发明的所有方面能够在权利要求的宽度之内。

用序列标识符编号（SEQ ID NO）提及核苷酸和氨基酸序列。SEQ ID NO与序列标识符<400>1(SEQ ID NO:1)、<400>2(SEQ ID NO:2)等数字上对应。表1和表2中提供了序列标识符的概述，分别按防御素命名的数字次序和序列标识符的数字次序列出。在权利要求之后提供了序列表。

本公开内容教导了防御素和编码防御素的基因分子在具有对植物致病性真菌的抗性或减少的敏感性的植物的产生中的用途。使用包括防御素的组合物来局部控制植物致病性真菌的侵袭在本文也成为可能。提到“防御素”包括其人工和天然变体。人工变体包括被工程化以承载来自包括嵌合和杂合的防御素的不同防御素的结构域和环的防御素。防御素可单独或与其他抗病原体剂联合使用，其他抗病原体剂包括但不限于透化防御素（permeabilizing defensin）和/或蛋白酶抑制剂或其前体形式。

本文教导了表达编码防御素的核酸分子的稳定的、基因转化的植物细胞和自其再生的植物和植物的子代的产生，其中所述植物细胞在基因转化之前不产生防御素。核酸分子的表达导致促进对植物致病性真菌的抗性的防御素的产生。

表现出对植物致病性真菌的抗性或减少的敏感性的转化的植物细胞、自其再生的植物和植物的子代在本文成为可能。在本文还成为可能的是能够产生表现出对植物致病性真菌的抗性或减少的敏感性的植物的种子和再生材料（reproductive material）和繁殖部分。

本文还教导了包括一种或多种防御素或包括防御素与另一种抗植物病原体剂的组合物，另一种抗植物病原体剂包括透化防御素和/或蛋白酶抑制剂。组合物可用于局部施加到植物的叶、茎、花、种子、根和周围土壤。

本文中成为可能的是用于产生具有对植物致病性真菌的抗性的植物的方法，该方法包括将编码防御素的核酸分子引入到植物细胞，所述防御素包括选自由SEQ ID NO:1到20和SEQ ID NO:62到66组成的列表的成熟结构域氨基酸序列。

本文考虑使用的防御素的实例包括由选自由SEQ ID NO:1到3组成的列表的成熟结构域氨基酸序列限定的防御素。

本文考虑使用的防御素的实例包括由选自由SEQ ID NO:4到6、16、63和64组成的列表的成熟结构域氨基酸序列限定的防御素。