[发明专利]贞芪扶正制剂中特女贞苷的含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种贞芪扶正制剂中特女贞苷的含量测定方法，属于中药质量检测技术领域。

背景技术

贞芪制剂有补气养阴、扶正固本之功效。现代药理实验证明能提高人体免疫功能，保护骨髓和肾上腺皮质功能，促进干扰素产生；配合肿瘤患者放、化疗，减轻病人放、化疗期间的毒副作用，促进正常功能的恢复的作用。其处方由黄芪、女贞子组成。目前，贞芪制剂供临床选择的常用剂型有片剂、胶囊剂、颗粒剂及滴丸剂等。

其中，女贞子中的环烯醚萜苷类成分特女贞苷具有免疫调节和抗氧化作用，是贞芪扶正制剂中的主要有效成分，因此对其进行精确的含量测定是非常必要的。虽然，《中国药典》中记载了女贞子中特女贞苷的具体含量测定方法，但是，还没有任何针对现有的贞芪扶正制剂中的特女贞苷成分的含量测定方法的记载，因此，现有的贞芪扶正制剂的质量检测标准是不完整、不准确的，亟需提供一种专门针对贞芪扶正制剂中特女贞苷成分的含量测定方法。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种贞芪扶正制剂中特女贞苷的含量测定方法，能够对贞芪扶正制剂中特女贞苷成分的含量进行快速、准确、高重现性、高回收率的测定。

本发明所述的贞芪扶正制剂：称取黄芪药材2084g、女贞子药材1042g混合，加入10倍量水煎煮2小时，过滤，收集煎液，连续两次向药渣中加入8倍量水煎煮1小时，过滤，合并煎液，超滤，浓缩，干燥，粉碎，加入适量辅料制成各种制剂。

为解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案：

一种贞芪扶正制剂中特女贞苷的含量测定方法，它是以特女贞苷对照品为对照，以甲醇:水/0.01%～5%磷酸水溶液/0.01%～5%冰醋酸/0.01%～0.5%甲酸水溶液=20～50:80～50或者乙腈:水/0.01%～5%磷酸水溶液/0.01%～5%冰醋酸/0.01%～0.5%甲酸水溶液=5～35:95～65为流动相的高效液相色谱法。

前述的贞芪扶正制剂中特女贞苷的含量测定方法照高效液相色谱法、按下述步骤进行测定：

（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇:水/0.01%～5%磷酸水溶液/0.01%～5%冰醋酸/0.01%～0.5%甲酸水溶液=20～50:80～50或者乙腈:水/0.01%～5%磷酸水溶液/0.01%～5%冰醋酸/0.01%～0.5%甲酸水溶液=5～35:95～65为流动相；柱温为20～40℃；检测波长为210～240nm；流速为0.5～1.5mL/min；理论板数按特女贞苷峰计算应不低于4000；

（2）对照品溶液的制备：取特女贞苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成浓度为0.2mg/mL的溶液，即得；

（3）供试品溶液的制备：采用方法①～③之一进行制备：

①精密称取贞芪扶正制剂或其内容物3g，精密加入甲醇100mL，称定重量，超声或回流提取30～60min，或者微波辅助提取2～10min，用甲醇补足重量，过滤，取续滤液即得；

②精密称取贞芪扶正制剂或其内容物3g，精密加入甲醇100mL，称定重量，超声或加热回流提取30～60min，或者微波辅助提取2～10min，用甲醇补足重量，过滤，精密量取续滤液50mL，减压回收溶剂，残渣加水稀释，上大孔树脂，水洗至无色，再以50%～95%的乙醇洗脱，洗脱液浓缩至干，残渣用甲醇溶解并转移至50mL容量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，即得；

③精密称取贞芪扶正制剂或其内容物3g，精密加入甲醇100mL，称定重量，超声或加热回流提取30～60min，或者微波辅助提取2～10min，用甲醇补足重量，过滤，精密量取续滤液50mL，减压回收溶剂，残渣加水溶解，过硅胶柱以氯仿:甲醇:水=5～45:3:1洗脱，洗脱液浓缩至干，残渣用甲醇溶解并转移至50mL容量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，即得；

（4）测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

前述的贞芪扶正制剂中特女贞苷的含量测定方法中，所述流动相为甲醇:0.05%磷酸水溶液=30:70。（甲醇:水=30:70可很好的将特女贞苷分离开来；其中水可用磷酸水溶液、冰醋酸或甲酸代替，因为水里加酸、加碱、加盐可改善峰形、提高分离度）。

前述的贞芪扶正制剂中特女贞苷的含量测定方法中，所述检测波长为224nm；流速为0.8～1.0mL/min；柱温为35℃。

前述的贞芪扶正制剂中特女贞苷的含量测定方法中，供试品溶液的制备方法③中过硅胶柱以氯仿:甲醇:水=20:3:1洗脱。