[发明专利]β-1,3-1,4葡聚糖酶的高效廉价生产方法在审
| 申请号： | 201310541840.4 | 申请日： | 2013-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN104630179A | 公开（公告）日： | 2015-05-20 |
| 发明（设计）人： | 艾对元;张卫兵;贠建民 | 申请（专利权）人： | 甘肃农业大学 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12R1/785 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 730070 *** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 聚糖 高效 廉价 生产 方法 | ||
【权利要求书】：
1.β-1,3-1,4葡聚糖酶的高效廉价生产方法，其特征在于步骤如下：
（1）产酶培养
将碎囊毛霉菌种（ATCC编号3.03441）接种于制备好的PDA斜面上，28℃培养48～72h，待孢子成熟即可使用；向培养成熟的试管斜面中注入5mL无菌生理盐水，用接种环或无菌玻棒搅动，刮下碎囊毛霉孢子，振荡均匀并稀释至104个/mL，得到孢子悬液；将麸皮和大麦以1:2比例混合，按50 %(W/V)加入自来水，121℃灭菌10 min，得到固体发酵培养基；将孢子悬液按5%(V/W)接入液体发酵培养基中，26℃培养96h，得到发酵底物；
（2）粗酶制备
向发酵底物以1:1比例加入pH值5.5的HAc-NaAc缓冲液100 ml,移入振荡器中200 r/min振荡30分钟，6559×g离心10min，收取上清；
（3）酶的精制
粗酶液经饱和度80%的硫酸铵盐析，透析24h浓缩处理，再经Sephadex G-100（葡聚糖凝胶G-100）柱凝胶过滤后，截取吸光值（OD=280nm）为280nm的组分；得到了电泳纯酶，比酶活达到225.02U/mg。
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