[发明专利]一种杜鹃花金踯躅的组培快繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种杜鹃花金踯躅的组织培养快繁方法，具体地说，涉及植物生物技术中植物组织培养方法。

背景技术

“金踯躅”是从羊踯躅实生苗中选育出的变异品种。羊踯躅隶属于杜鹃花科(Ericaceae)杜鹃花属(Rhododendron)羊踯躅亚属，落叶灌木。“金踯躅”的花金黄色，花色鲜艳，具有较高的观赏价值，由于“金踯躅”为羊踯躅芽突变得到的变异性状的新品种，并且经过新品种发明人的多年试验，金踯躅的扦插几乎不生根，扦插较为困难。迄今，金踯躅没有相关生物技术方法快繁的研究与报道，为使金踯躅优良的特性能够保存和可持续利用，需要研究该种的组织培养，并形成一套专门的组织培养快繁技术体系。

发明内容

本发明的目的在于克服金踯躅生扦插困难、成活率低的不足，提供一种杜鹃花金踯躅的组织培养方法，使之能够繁衍。该新品种金踯躅在优良性状的保存能够得到保障条件下，同时缩短离体培养时间，提高生根率和幼苗移栽率，为新品种“金踯躅”的可持续利用奠定组培种苗繁育基础。

为了实现本发明的目的，本发明提供了如下的技术方案：

.一种杜鹃花金踯躅的组培快繁方法包括选择外植体、消毒、丛生芽诱导、继代并生根培养和试管苗移栽步骤，外植体取金踯躅的茎段，丛芽诱导培养基为改良Anderson +2.0mg/l ZT +0.1mg/l NAA，pH5.1-5.2；继代培养基为改良Anderson +1.0mg/l ZT +0.1mg/l NAA；生根培养基为1/2改良Anderson +0.5mg/l NAA。

所述外植体的消毒先用5%洗衣粉水浸泡清洗20min，再用无菌水冲洗至无泡沫，然后采用75%的酒精灭菌30s，无菌水冲洗3遍后再用0.1%升汞溶液进行表面消毒8min，分两次进行，第一次消毒5min，不断震荡后用无菌水清洗3-5遍，再用0.1%升汞消毒3min后用无菌水清洗3-5遍。

所述丛芽诱导和继代及生根培养的温度为20-23℃，湿度30-45%。 

所述丛芽诱导和继代及生根培养的光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX。

试管苗移栽是生根组培苗在培养瓶内培养45天以后，炼苗7天，再移栽到温室大棚。

移栽基质为1份珍珠岩+1份腐殖土，pH为5.1-5.2。

试管苗移栽在早上8-11点以前，温度为18-25℃下进行。

杜鹃花金踯躅的组培快繁方法具体操作是：选取金踯躅茎段为外植体，用5%的洗衣粉水进行浸泡和冲洗，然后用75%酒精消毒30s，后用0.1%升汞溶液进行消毒8min，分两次进行，第一次5min，不断震荡后用无菌水清洗3-5遍，再用0.1%升汞消毒3分钟后用无菌水清洗3-5遍；

将金踯躅茎段置于消毒后的滤纸上，切取一叶一段，接种至诱导培养基改良Anderson +2.0mg/l ZT +0.1mg/l NAA， pH5.1-5.2，温度20-23℃，湿度30-45%，光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX下培养，长出丛芽后转接入改良Anderson +1.0mg/l ZT +0.1mg/l NAA中进行增殖、继代和生根，继代3-4次，每次30天；

将继代苗转入生根培养基，茎段未木质化，生根培养基为1/2改良Anderson +0.5mg/l NAA，45天生根培养后进行组培苗炼苗7天后得试管苗，将试管苗移栽到基质为1份珍珠岩+1份腐殖土，pH为5.1-5.2，湿度50-60%的大棚内，每天早晚各喷水一次。

 

本发明技术方案提出是基于下述的研究基础：“金踯躅”为杜鹃花新品种，色彩艳丽丰富，但金踯躅的生根难度较大，扦插几乎不生根，为了解决其大量快繁、保存和可持续利用，故此发明金踯躅组织培养的技术。

本发明组培扩繁不仅可以在短时间内获得大量的再生植株，而且移栽生长良好且能保持其优良性状不变。试管苗移栽的温度控制在18-23℃，最好在早上8-11点进行移栽，组培苗虽然在生长过程中很少受病虫害的浸染，但为了预防病虫害的发生，在生长季内喷施多菌灵、氧化乐果2-3次为宜。夏季要注意通风。

本发明方法其优点在于：

1、建立了有效的“金踯躅”组培快繁方法，解决了其生根困难，快繁受阻的状况。

2、通过组培快繁得到的幼苗，成苗容易，一致性强，生长健壮,叶色浓绿，很少病虫害，易于管理。