[发明专利]血液相关脂肪酸谱的建立方法

说明书

技术领域

本发明属于医学、流行病学领域，具体的说，涉及采用气相色谱建立一种测定血液相关（血浆，血清，血小板，红细胞等）的总酯、磷脂膜、或甘油三酯的脂肪酸谱，并对与脂代谢相关的慢性疾病（糖尿病、代谢综合症、高脂血症、非酒精性脂肪肝、高血压等）人群的脂肪酸谱进行了分析，从而建立相关的脂肪酸谱。即，本发明涉及健康人群和慢性病患者血液脂肪酸谱的建立方法。

背景技术

随着中国经济的快速发展，人们的日常饮食结构逐渐西方化，上个世纪中叶营养不良型疾病为主的形势已经转变到现在营养过剩型慢性疾病的盛行和快速增长，与膳食相关的疾病已经跃居为居民死亡的主要原因。膳食的要求也从满足温饱过渡到各种营养素合理摄入的健康饮食，通过合理的膳食指导来防治非传染性慢性疾病，显得越来越重要。饮食和生活方式在慢性病的病情演化中起到很重要的作用，营养调节可以改变慢性病的病情发展。

目前还没有中国人饮食中的脂肪酸类型的数据，因为人们在家中并不能准备所有的食物，而且食物中摄入的脂肪数量高度可变，所以还没有一个精确的方法去评价饮食中的各个脂肪酸摄入情况，因此这就需要采用生物标记物来提高评估的准确性。今年来，在长期的脂肪酸摄入量的模式中，组织脂肪酸（血清/血浆、动物脂肪、血小板和红细胞）被用来作为合适的生物标记物。

血浆或血清磷脂脂肪酸水平主要受到饮食因素的影响，尤其是n-3多不饱和脂肪酸（n-3polyunsaturated fatty acids,n-3PUFA）。研究表明，补充n-3PUFA能够增加组织磷脂多不饱和脂肪酸的含量，但是不同人群膳食脂肪酸摄入量不一样，而且膳食脂肪酸需要在体内进行一系列的生理反应才能进入细胞膜。

研究表明，增加n-3PUFA摄取量可阻止心率不齐的发生，降低血栓的发生概率，降低血清甘油三酯水平，舒缓动脉粥样硬化斑的生长，增强血管内皮细胞功能，降低血压，减少炎症的发生。

多不饱和脂肪酸（PUFA）在血多细胞生理功能中起着重要作用，例如PUFA是细胞膜的组成成分，同时也是许多重要的炎症调节因子，如花生四烯酸等的前体。PUFA能够影响细胞膜的流动性和和胆固醇含量以及影响细胞信号分子的生成，大量的研究表明多不饱和脂肪酸与众多复杂的疾病有关。磷脂多不饱和脂肪酸组成与心血管疾病、代谢综合症、2型糖尿病、血型同型半胱氨酸等相关。

因此，建立一种简单易行且有效的脂肪酸谱的方法势在必行，而且通过建立慢性病相关的脂肪酸谱，对膳食脂肪的摄入进行指导，从而减少相关慢性病的发生，为人们的健康生活多一层保障是有着重大意义的。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种血液相关脂肪酸谱的建立方法。本发明的方法简单易行，有效可信；采用本发明的方法建立中国慢性病人群的血液相关脂肪酸谱，以便对人们的膳食脂肪摄入进行指导，从而减少慢性病的发生。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种血液相关脂肪酸谱的建立方法，包括以下步骤：

1）选择研究对象，并将已脱离研究对象身体的血浆、血清或血小板中的总脂肪酸成分进行提取、分离、浓缩，从而得到总脂；

2）、将总脂用薄层层析法分离磷脂、甘油三酯；

3）、将分离得到的磷脂、甘油三酯进行甲酯化；

4）、将甲酯化脂肪酸采用气相色谱分离法测定脂肪酸成分；

5）、将脂肪酸进行图谱分析、SPSS数据统计分析；

6）、将分析所得的数据进行整理、总结。

作为本发明的血液相关脂肪酸谱的建立方法的改进：研究对象为哺乳动物，例如为人。

作为本发明的血液相关脂肪酸谱的建立方法的改进：该脂肪酸谱的建立方法适用于建立器官的脂肪酸谱；该器官包括心、肝、脾、肾、大脑、脂肪。

本发明在采用GC分析血液中脂肪酸的成分，建立相关的脂肪酸谱。

脂肪酸谱的建立方法是：获得血液——血液分离为血浆、血清或血小板——血液储存于-80℃——总脂肪成分的提取——总酯分离——总酯浓缩——（磷脂的分离）（如果测定总酯脂肪酸的话，此步骤可以省略，直接甲酯化）——脂肪酸甲酯化——甲酯物的提取、纯化—色谱纯正己烷，进GC——图谱分析——数据统计——脂肪酸谱完成。

首先声明，虽然本发明中涉及使用血液（新鲜血液）；但针对的只是已脱离人体的新鲜血液，其具体获取过程本身并不属于本发明的内容。本发明对其采集方法的详细描述只是为了更清楚地介绍生物材料的准备过程，但该描述并不意味着相关技术手段也属本发明要求保护的内容。

在本发明中，遵守以下规则：