[发明专利]一种检测毒死蜱农药残留的酶传感器制备方法

说明书

技术领域

本发明提供一种检测毒死蜱农药残留的酶传感器制备方法，属于生物传感器制备领域。 

背景技术

近年来，农药残留引起的中毒事件屡屡发生，果蔬中的有害、剧毒农药的残留问题一直是人们关注的焦点，也是现今中国加入WTO后，农产品出口遭遇“绿色壁垒”的主要影响因素之一。随着我国人民生活水平不断提高，农产品的质量安全问题越来越受到关注，尤其果品、蔬菜中农药残留问题已经成为公众关注的焦点。全国每年都有上百起因食用被农药污染的农产品而引起的急性中毒事件，严重影响广大消费者的身体健康，因此由农药残留超标导致的食品安全问题，已越来越受到各国政府和公众的重视。有机磷农药是我国应用最为广泛的一类农药，其中毒死蜱是目前全世界生产和销售量最大的杀虫剂品种之一。毒死蜱是高效中毒的广谱杀虫剂兼除草剂，具有一定的内吸性，可以通过食物链的富集作用转移至人体，对人体具有潜在致癌作用。可见，加强对农产品中农药残留的检测对保护生态环境，尤其是保障人类健康有着十分深远的意义，其中毒死蜱一直是环境和食品中农药残留检测的重要项目。 

传统的农药残留检测方法主要有：气相色谱（GC）、高效液相色谱法(HPLC)、色谱/质谱联用技术(GC/LC-MS)、毛细管电泳法(CE)、荧光分析、酶联免疫法(ELISA)。这些方法虽然选择性好、灵敏度高、准确度高、检出限低，可同时检测多种元素或化合物，但其需要昂贵的仪器设备，样品前处理过程繁琐、费时，并且对分析人员的技术水平要求很高，不适于现场快速检测。常用的农药残留快速检测方法有酶抑制法(酶抑制试纸法和酶抑制分光光度法)，可以实现有机磷农药的现场快速检测，具有较好的实用价值。但是，速测卡是通过肉眼观察卡片的颜色变化，因此一般只能用于严重超标的蔬菜样品的定性测量。酶抑制分光光度法的原理是基于吸光度的变化进行检测的，但蔬菜水果中大量的色素会影响检测结果的准确度。并且上述方法存在回收率低、错检、漏检比例较高、重复性差、难以满足低残留和定量检测的要求等缺点。酶传感器是利用有机磷的毒理性原理所研制的传感器，与传统的分析方法相比，它具有特异性强、分析速度快、结构简单、成本低廉等优点。酶传感器的关键是酶的固定技术，酶的固定技术包括酶的固定方法和固定酶的载体材料。其直接影响生物分子的固定化、酶传感器的稳定性和灵敏度等主要性能。 

发明的目的在于提供一种能克服上述缺陷以及操作简单、灵敏度高、检出限高的检测毒死蜱农药残留的酶传感器制备方法。 

其技术方案为：一种检测毒死蜱农药残留的酶传感器制备方法，其特征在于：电流型酶传感器的敏感界面组成包括由多壁碳、二氧化锡、壳聚糖制备的纳米复合膜和0.5%Nafion保护膜，进而固定酶的技术。 

所述的一种检测毒死蜱农药残留的酶传感器制备方法，其特征在于：金电极(d=1mm)的清洗，酶传感器敏感界面的构建及过程表征(制备多壁碳-二氧化锡纳米复合材料并以壳聚糖作为分散剂进行分散，利用多壁碳-二氧化锡的协同作用共同修饰电极)，酶传感器标准曲线的建立，酶传感器性能的检测，酶传感器对实际样品的检测。 

所述的一种检测毒死蜱农药残留的酶传感器制备方法，其特征在于：实验条件的优化，主要包括酶滴加量、测试底液的pH以及农药抑制时间；酶传感器性能检测包括重现性、稳定性、再生性以及酶传感器对蔬菜样品回收率的测定。