[发明专利]一种灰树花优质菌株的初筛方法

说明书

所属技术领域：

本发明涉及食药用菌培养领域，具体的说涉及一种灰树花优质菌株的初筛方法。

背景技术：

灰树花（学名：Grifola frondosa），又名贝叶多孔菌、云蕈、栗子蘑、栗蘑、千佛菌、莲花菌，是一种产于北美、中国、日本东北部的食用菌。它的顶端类似于波纹而没有菌伞，通常集簇长在橡树的根部，看起来像一群飞舞的蝴蝶。灰树花在日本已经实现工厂化栽培，是其第3大宗的工厂化栽培食用菌。我国浙江省庆元县的传统栽培方式也比较成熟，该栽培模式采用了菌棒式两次出菇的方式，可取得较高的产量，目前已形成了规模化生产基地。而我国的工厂化栽培近年来也开始通过引进消化吸收的方式，取得了一定的进展，目前已经有少量工厂化栽培的灰树花供应市场。在金针菇、杏鲍菇等品种产能过剩，价格低迷的情况下，灰树花的食药用价值被越来越多的人所接受和认可，未来具有广阔的市场前景，但迄今为止，我国自主选育的灰树花品种少之又少，尤其是适合我国工厂化栽培的灰树花品种几乎没有，这极大的限制了它的发展。

在工厂化条件下，灰树花是一种对通气和湿度条件极为敏感的食用菌。现有一些品种均不能很好的适应工厂化条件，出现吐黄水、污染、原基发生率低、开片不充分等严重影响生产的问题。选育灰树花新品种成为当务之需，但是新品种选育产生的后代菌株一般数量在200以上，目前主要在栽培袋中进行多轮筛选，第一轮小试初筛将菌株数量筛至40个左右，第二轮小试复筛筛至10-20个，第三轮中试筛至两三个并进行下一轮示范栽培。每轮筛选都需要制作栽培袋,特别是小试初筛，因为后代菌株数量大，良莠不齐，且一般自交/杂交后代中优良菌株比例较小，而栽培袋制作工作量大且菇房运行成本高，需要有便捷的菌种初筛方法使得优良菌株被快速筛选出。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种灰树花优质菌株的初筛方法，该方法的具体步骤如下：

（1）灰树花菌种接种于培养管/瓶中，培养8-12天后，观察菌丝吃料情况及有无杂菌污染，菌丝进入快速吃料阶段后每隔10天划线；

（2）菌丝发满并后熟后可自主发生原基，观察原基形成及发生率，同时观察培养料表面黄水及霉菌的发生，鉴定每个菌株的抗杂菌能力，挑选菌丝浓白致密，长势好，原基形成率高，形成时间一致，不吐黄水，不染杂菌的，即得到初筛的菌株。

用本发明的灰树花优质菌株的初筛方法，初筛得到的菌株，可以进入下一轮菌包栽培实验，进一步观察其子实体发生及稳定性。在之后的多轮栽培试验后，选育出原基发生率高、发生时间整齐、出菇率高、生物学转化效率高的优质菌株。

品种选育时育种后代的菌株一般数量在200以上，全部采用菌包筛选的方法的话工作量相当繁重，而采用本发明的初筛方法后，工作量大幅度减少，装料，接种，培养，鉴定菌株原基发生前的相关性状等都只需在实验室中完成即可，而抗逆性强、原基形成整齐一致且形成率高一般都是优良菌株的表现，后期菇房条件控制得当的话都可以发育成成熟子实体，所以本方法是筛选育种后代优良与否的便捷途径。

本发明提供的优质菌株的初筛方法，具有如下优点⑴本方法中各步骤在实验室条件下即可完成，节省了以往菌种初筛时大量菌包的制作、接种、观察等工作量，在早期筛选中大幅度剔除劣质菌种，为后期筛选缩小范围；⑵本方法在实验室条件下诱导原基形成，在达到筛选目的的前提下节省了菇房运行成本；⑶本方法筛选出的菌株原基形成率高，形成时间一致，抗逆性高，这些是优良菌株的必备优点；⑷本方法与菇房条件下筛选菌种相比，环境因素的影响较小，获得的结果更稳定可靠，提高了优良菌株的获得率。

具体实施方式；

本发明的一种灰树花优质菌株的筛选方法，具体包括如下步骤：

⑴培养基制备

培养基制备时原料配比为：木屑35%，棉籽壳35%，麸皮23%，玉米粉5%，红糖1%，石膏1%，棉籽壳、麸皮、玉米粉要求干燥无霉变。需要用到的材料有30mmm×200mm的玻璃试管（或250ml三角瓶），牛皮纸，透气封口膜，橡皮筋。将所有培养基原料用拌料机搅拌约30min直至均匀，红糖事先用水溶化后加入运行中的拌料机，最终培养料含水量要求为62%-65%，手动装管或装瓶，每管装湿料约55g（每瓶110g左右），料面距离管口4cm以上，在料中心位置打深度2cm孔，将试管和三角瓶内外洗干净后沥掉多余水分，管口（或瓶口）套一层牛皮纸，一层透气封口膜，用牛皮筋扎口，放置在灭菌筐中准备灭菌。

⑵高压灭菌

装料完成后立即采用自动灭菌锅进行高压灭菌，121℃维持2h，灭菌结束后将试管置于室温进行冷却。

⑶接种