[发明专利]一种槲蕨的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养的快繁方法，包括外植体的消毒，愈伤组织的诱导，增殖，分化，生根培养等，属于植物技术领域。

背景技术

槲蕨（Drynariea fortunei （Kunze） J. Sm）是蕨类植物槲蕨科（Drynariaceae）槲蕨属（Drynarie）的常绿多年生草本植物，别名骨碎补、石岩姜，分布于中南、西南地区及台湾、福建、浙江等省，常附生在岩壁、石壁、树干上，喜潮湿、通风、稍遮蔽之环境。在医药上，槲蕨属植物具有强筋骨、防止链霉素、抗卡那霉素的毒副作用、降血脂、强心、镇痛镇静，抗肿瘤、免疫促进、抗凝血、抗补体、抗溃疡、抗病毒和降血糖等作用。多生长在较光秃的树干或岩石上，小生境郁闭度较低，且附生的生态学意义就在于获得更多的光线，这些现象似乎说明槲蕨应是一种喜光植物。作为一种应用历史悠久、疗效显著、药理研究比较透彻的药材，槲蕨的市场需求量是可观的。但对于野生资源保护方面还未见有系统的报道。发展槲蕨的人工栽培和组织培养，是资源保护与持续利用的迫切之需。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种槲蕨快速繁殖方法的制备，由该方法可以为大规模种植槲蕨提供种苗，可以保护野生种苗的品质和遗传的稳定性。

本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的：

一种槲蕨的快速繁殖方法，包括槲蕨无菌叶片的获得，槲蕨愈伤组织诱导，愈伤组织分化，四倍体的诱导，炼苗移栽等步骤，其技术方案如下：野外采取槲蕨幼嫩的叶片，流水冲洗30分钟，0.1%的次氯酸钠10min，流水冲洗4-5次，灭菌后的叶片接种到MS+2ip0.8mg/L+2，4，5-T2mg/l+100mg/l半胱氨酸，培养基中进行愈伤组织诱导，取诱导出来的愈伤组织接入到MS+IAA0.2mg/L+KT1.0mg/L+YE培养基中进行愈伤组织的分化诱导，光照强度2000lx，温度25℃，光期12h，暗期12h，湿度60%-70%，培养数周后，在培养基中加入秋水仙素进行四倍体诱导，四倍体诱导之后加入MS培养基中进行壮苗培养，培养条件为光照强度4000lx，温度25℃，光期14h，暗期10h，湿度60%-70%，试管苗长约5cm时进行炼苗移栽，进而进行大田大规模栽种。

采用本发明调控出来的槲蕨试管苗长势好，成活率94%，周期短，操作可控，可进行野外大规模栽种或推广应用。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

一种槲蕨的快速繁殖方法，包括槲蕨无菌叶片的获得，槲蕨愈伤组织诱导，愈伤组织分化，四倍体的诱导，炼苗移栽等步骤，其技术方案如下：野外采取槲蕨幼嫩的叶片，流水冲洗30分钟，0.1%的次氯酸钠10min，流水冲洗4-5次，灭菌后的叶片接种到MS+2ip0.5mg/L+2，4，5-T1mg/l+100mg/l半胱氨酸，培养基中进行愈伤组织诱导，取诱导出来的愈伤组织接入到MS+IAA0.1mg/L+KT0.5mg/L+YE培养基中进行愈伤组织的分化诱导，光照强度2000lx，温度25℃，光期12h，暗期12h，湿度60%-70%，培养数周后，在培养基中加入秋水仙素进行四倍体诱导，四倍体诱导之后加入MS培养基中进行壮苗培养，培养条件为光照强度4000lx，温度25℃，光期14h，暗期10h，湿度60%-70%，试管苗长约5cm时进行炼苗移栽，进而进行大田大规模栽种，成活率85%。

实施例2

一种槲蕨的快速繁殖方法，包括槲蕨无菌叶片的获得，槲蕨愈伤组织诱导，愈伤组织分化，四倍体的诱导，炼苗移栽等步骤，其技术方案如下：野外采取槲蕨幼嫩的叶片，流水冲洗30分钟，0.1%的次氯酸钠10min，流水冲洗4-5次，灭菌后的叶片接种到MS+2ip1mg/L+2，4，5-T2mg/l+100mg/l半胱氨酸，培养基中进行愈伤组织诱导，取诱导出来的愈伤组织接入到MS+IAA0.3mg/L+KT1mg/L+YE培养基中进行愈伤组织的分化诱导，光照强度2000lx，温度25℃，光期12h，暗期12h，湿度60%-70%，培养数周后，在培养基中加入秋水仙素进行四倍体诱导，四倍体诱导之后加入MS培养基中进行壮苗培养，培养条件为光照强度4000lx，温度25℃，光期14h，暗期10h，湿度60%-70%，试管苗长约5cm时进行炼苗移栽，进而进行大田大规模栽种，成活率87%。

实施例3