[发明专利]纳米金/壳聚糖-石墨烯-亚甲蓝修饰的免疫传感器的制备方法

权利要求书

1.纳米金/壳聚糖-石墨烯-亚甲蓝修饰的免疫传感器的制备方法，其特征在于：壳聚糖-石墨烯-亚甲蓝纳米复合物的制备，制备步骤为：

将壳聚糖溶于1.0%的醋酸溶液中，配制成0.5% 壳聚糖溶液，室温下磁力搅拌至壳聚糖完全溶解，然后用NaOH将混合液的pH值调到5.0，称取10mg石墨烯加入到10mL 0.5% 壳聚糖溶液中，超声分散8h得到分散均匀的壳聚糖-石墨烯纳米复合液，称取一定量的亚甲蓝粉末溶于乙醇溶液中，配制成1mg/mL的亚甲蓝溶液，再将壳聚糖-石墨烯纳米复合液与亚甲蓝溶液以不同的比例混合，超声至分散均匀、稳定，经实验验证，石墨烯与亚甲蓝比例为2：1时，电流响应最强，且修饰电极表面信号最稳定。

2.如权利要求1所述的纳米金/壳聚糖-石墨烯-亚甲蓝修饰的免疫传感器的制备方法，其特征在于利用电沉积纳米金和壳聚糖-石墨烯-亚甲蓝纳米复合物共同修饰电极的免疫传感器的制备，制备步骤为：

将预处理好的玻碳电极浸入含有0.1M氯化钾5mL 0.3mM的氯金酸溶液中，在-0.2V的电压下应用恒电位法电沉积200s，电沉积结束后用PH=7.5的磷酸盐缓冲液冲洗电极表面，氮气吹干；电极表面晾干后，取7μL壳聚糖-石墨烯-亚甲蓝纳米复合液滴涂在电极表面，常温下静置2h，然后用PH=7.5的磷酸盐缓冲液冲洗，氮气吹干；将上述经纳米材料修饰好的电极浸入5%的戊二醛溶液中，30min后取出，冲洗吹干；将电极沉浸在毒死蜱单克隆抗体溶液中，4°C条件下浸泡8-12h，取出后用磷酸盐缓冲液冲洗表面，晾干待用；最后将上述制备好的电极浸于0.5%的牛血清蛋白溶液中，室温下静置2h，以封闭非特异性结合位点，取出置于室温下晾干，免疫传感器制作完成，保存在4°C条件下备用。