[发明专利]一种封闭式超滤管道系统及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物化学领域，具体涉及一种病毒载体的纯化系统及其应用。

背景技术

在疫苗生产的工序中，需要对所收获的病毒液进行纯化以去除非抗原类的杂分子物质，获得较纯的抗原用来制备疫苗终产品。在病毒纯化的工艺中，超滤浓缩和透析为常用的方法。在病毒的浓缩和提纯工艺中，需要向病毒液中加入外源性的物质，比如沉淀工艺中引入的PEG6000，抽提工艺中引入的三氯甲烷，层析过程中引入的吐温-80等。上述外源物质的残留影响产品质量，为获得纯化后病毒液，在对病毒进行浓缩的同时需要去除引入的杂质分子。纯化阶段常常采用超滤浓缩和多次透析相结合的方法去除上一工序所引进的外源物质，如PEG6000、三氯甲烷、吐温-80等。

在疫苗的生产工艺中，采用PEG6000沉淀后离心的方式将病毒液按工艺所需倍数进行浓缩，以等体积或多倍体积的方式加入磷酸盐缓冲液（0.01mol/L PBS溶液）稀释，将稀释后的病毒液再次进行浓缩，如此反复进行以达到去除病毒液中杂质分子的作用，称此步骤为透析。经多次透析后即可获得符合生产所要求标准的疫苗病毒液。

疫苗生产工艺中无菌的控制非常必要，直接影响终产品的质量，特别是非灭活类的疫苗，主要依靠疫苗生产过程中的无菌控制。在现有的疫苗生产工艺技术中，多数企业采用的病毒超滤步骤多为分步进行，即对超滤系统分别进行冲碱清洁后冲注射用水，再用缓冲液平衡超滤系统，最后浓缩和透析病毒液，且使用硅胶管道分别连接超滤系统的进液、回流与滤过端，在操作过程中分别将与超滤系统的进液、回流与滤过端连接的硅胶管直接伸入桶内，在操作环境中属于敞口生产，采用的这种管道为非闭合式分类管道。在无菌生产过程中这类管道较分散，在物品准备的清洁过程及生产操作过程中需要多次重复的拆装和组合，工作量大且管道易混淆，不能保证专管专用，增加交叉污染的风险。总之，这类非闭合式分类管道不仅在操作过程中步骤繁琐、耗时耗力，而且整个过程很难保证无菌，操作过程中带来的污染风险程度较高。

发明内容

介于上述现有技术的不足和疫苗生产的需要，本申请提出一种可拆卸清洁和组合后再灭菌使用的封闭式超滤组合管道系统，不仅有效地保证了疫苗生产工艺中的无菌生产，而且操作简便，适合大规模的生产。

本发明的另一目的是提出所述系统的应用。

实现本发明上述目的的技术方案为：

一种封闭式超滤管道系统，包括缓冲液容器1、待浓缩液容器2、最终收集液容器3、浓缩液容器4和超滤设备5；

所述缓冲液容器1、待浓缩液容器2、最终收集液容器3和浓缩液容器4的均设置有顶盖，顶盖上设置有孔，有管道穿过所述孔从容器中引出；

所述缓冲液容器1引出的管道6与待浓缩液容器2引出的管道7分别连接三通11的两个接口，所述三通11的第三个接口通过泵16和管道与三通12的一个接口连接；所述最终收集液容器3和浓缩液容器4引出的管道10、8分别连接三通13的两个接口，所述三通13的第三个接口与三通12的另一个接口通过管道9连接；所述三通12的第三个接口与连接超滤设备5的回流管路14连接；所述浓缩液容器4还通过泵17、进液管路15与超滤设备5连接。

其中，所述缓冲液容器1引出的管道6与待浓缩液容器2引出的管道7均通过所述孔插入容器底部，所述管道6、7与容器底部接触的部分为不锈钢材质或可高压灭菌的塑料材质的直管，所述管道6、7其余部分为硅胶材质，优选铂金硫化硅胶。

其中，所述进液管路15和/或管道8与浓缩液容器4底部接触部分管道为不锈钢材质或可高压灭菌的塑料材质的直管；其余部分为硅胶材质，优选铂金硫化硅胶。

其中，所述最终收集液容器3和浓缩液容器4引出的管道10、回流管路14、进液管路15均为硅胶材质，优选为铂金硫化硅胶。

其中，所述三通11为T三通，所述三通12、13为Y三通，所述T三通与Y三通的材质为可高压的塑料材质，如聚丙烯PP。

其中，所述超滤设备5还连接有用于排出废液的滤过管路16。

本发明所述的封闭式超滤管道系统的应用，其特征在于，包括步骤：

1）浓缩：将病毒液接入待浓缩液容器2，封闭管道6、回流管道14和管道10，用泵16将病毒液泵入浓缩液容器4；

然后打开回流管道14，开启泵17，启动超滤设备5运行，超滤设备5产生的浓缩液通过回流管道14进入浓缩液容器4；