[发明专利]一种L-色氨酸的分离提纯方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种氨基酸分离提纯方法，特别是涉及一种从发酵液中分离提纯L-色氨酸的方法。

背景技术

L-色氨酸是含有吲哚基的芳香族氨基酸，在人和动物的生长发育和新陈代谢方面起着重要的作用，是人体必需的八种氨基酸之一，其晶体白色或略带黄色。色氨酸在人体内能够合成多种激素和生理活性物质，也参与调节人体的神经生理活动，并且在植物蛋白中比较缺乏，因此，色氨酸就被广泛应用在了医药、食品和饲料等行业中。L-色氨酸生产方法有化学合成法、蛋白分解法、微生物转化法、酶法和直接发酵法等，其中直接发酵法是目前色氨酸生产的主流方法。

直接发酵法所产生的含有色氨酸的发酵液还需要进一步的分离纯化来获取高纯度的色氨酸结晶。从发酵液中分离提纯色氨酸的通常方法是：发酵液经过膜过滤或絮凝沉淀除掉菌体蛋白，料液通过离交固定床吸附、解析色氨酸，达到除杂的目的，解析液通过活性炭脱色提高产品透光，最后浓缩料液，结晶干燥制成色氨酸成品。上述方法中，絮凝剂的使用，增加了生产成本、污染环境，且得到的料液澄清度很差，影响下游的产品纯化过程；而离交固定床的使用，也会造成酸、碱和水的浪费；活性炭的使用会对环境造成污染，并且活性炭难彻底去除，其残留影响了最终产品的质量。

2012.02.08公开的申请号为CN201110227776.3的中国发明专利公开了一种离子交换树脂直接提取发酵液中色氨酸的方法，将含有色氨酸的发酵液经灭活、调酸至pH值为3～4的预处理后，按发酵液中含有的色氨酸对应每20克的量加入0.8～1.5升上批次分离废菌渣后的清液混合均匀后得到稀释后的发酵液，然后进入离子交换树脂柱中进行循环交换吸附，离子交换树脂洗清后经过氨水解析，得到富集色氨酸的解析液，解析液经过进一步的纯化处理得到成品色氨酸。该方法采用的离子交换设备属于离交固定床，不能实现色氨酸发酵液的连续分离纯化，且造成酸、碱和水的浪费。

2009.07.29公开的申请号为CN200910024690.3的中国发明专利公开了一种从发酵液分离色氨酸的方法，通过微孔膜过滤除菌体、膜分离除胶体蛋白和色素等大分子有机物质、电渗析除无机盐及反渗透浓缩，最终得到色氨酸晶体。该方法采用了膜技术来分离纯化色氨酸，但采用多级的膜处理降低了色氨酸的总体得率。

2009.03.04公开的申请号为CN200710059347.3的中国发明专利公开了一种利用直接发酵法生产L－色氨酸的离子交换提取工艺，采用不锈钢管式膜分离系统过滤发酵液，应用离子交换法提取L－色氨酸以及产品的浓缩和结晶，提取总收率为63.4％。该方法采用的离子交换设备属于离交固定床，不能实现色氨酸发酵液的连续分离纯化，且造成酸、碱和水的浪费，且总体得率偏低。

2010.05.19公开的申请号为CN200910211061.1的中国发明专利公开了一种L-色氨酸的提取方法，包括如下步骤：1)将L-色氨酸发酵液的pH值调至1.5-4.5，然后进行膜过滤；2)膜滤出液用装有阳离子交换树脂的模拟移动床离交系统进行分离；3)洗脱液调pH值至6-7；4)调酸后的洗脱液加热脱色；脱色液经后处理即得L-色氨酸。该方法所采用的模拟移动床离交系统会造成酸、碱和水的浪费，且解析液通过活性炭来脱色，活性炭无法彻底去除，影响了产品的质量。

发明内容

本发明提供了一种从发酵液中分离提纯L-色氨酸的方法，以解决现有技术中存在的上述问题。

本发明采用如下技术方案：

一种L-色氨酸的分离提纯方法，包括如下步骤：

1）将色氨酸发酵液用酸调节pH至2.5-4.0，采用孔径50-100nm陶瓷膜过滤除菌；

2）陶瓷膜滤液通过逆时针转动的连续离子交换移动床除杂，连续离子交换移动床按顺时针方向分为水洗料区、进料区、盐酸再生和水洗酸区、氨水解析和水洗氨区以及产品顶水区；

3）从连续离子交换移动床解析下来的解析液经过膜截留分子量为300-1000Da的纳滤膜脱色；

4）脱色后的料液通过反渗透膜进行脱水浓缩。

进一步的，所述步骤1）中调节pH值所用的酸为硫酸，过滤温度为0-80℃，进压3-4bar，出压1-2bar。

进一步的，所述步骤1）中发酵液浓缩3-6倍时，加水顶洗，加水量为发酵液体积的0.6-0.8倍。

进一步的，所述步骤2）中连续离子交换移动床所用树脂为强酸性或弱酸性阳离子树脂，例如D001、732或LH-2；解析氨水浓度为2-3%，盐酸浓度为4-6%，连续离子交换移动床运行温度为40-60℃，转盘周期10小时。