[发明专利]一种长效酶标板稳定剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于维持酶标板中蛋白活性的酶标板稳定剂。

背景技术

免疫检测技术在当今的临床检测及生命科学研究中都得到了广泛的应用，相关产品数量巨大，市场前景广阔。免疫检测技术包括酶联免疫分析技术、化学发光免疫分析技术、时间分辨荧光免疫分析技术等，这些检测技术所用的固相载体大部分为酶标板。

酶标板作为免疫检测试剂盒的关键组分之一，不仅要有一定的敏感度和特异性，其重复性和稳定性也是非常重要的。良好的稳定性，是其数据可靠性的一个重要标志。但是，一些酶类及蛋白标记物质，其稳定性是非常差的。当抗原或抗体包被于酶标板中后，在运输及长期保存的过程中，抗原或抗体的结构有可能发生改变，导致酶标板原有的检测功能衰退或彻底丧失，从而导致检测试剂的整体失效。

目前解决酶标板的稳定性问题的方法有两种：一种是将封闭工艺和稳定工艺分两步，即先封闭，后加稳定剂；该方法耗时长、效率低。第二种是将封闭工艺和稳定工艺合为一体，实现在一步中达到封闭及稳定的效果。该方法具有耗时短，操作简单等特点，已逐渐被大多数生产厂家所采用。

近年来，人们发现了一些有助于提高蛋白质溶液稳定性的物质，如牛血清白蛋白（BSA）等。将牛血清白蛋白添加到酶标板中，可以在一定程度上保持蛋白质的活性，但是效果仍然不理想。因此，很有必要开发一种由多组分构成的价格低廉且长效酶标板稳定剂。

中国专利CN201110162393.2公开了一种微孔板封闭稳定剂，其包括蛋白、糖类、有机聚合物、非离子型表面活性剂、防腐剂和缓冲液，可以有效延长微孔板的有效期；非离子型表面活性剂在生物科学领域有着广泛的应用，但是其仍旧具有一些生物毒性，如吐温类表面活性剂有溶血作用，且吐温20色深、有异味。中国专利CN201210116851.3公开了一种酶联免疫体外诊断试剂中封闭液，其包括缓冲液、牛血清蛋白、海藻糖、蛋白稳定剂、L-赖氨酸、Proclin300以及氢氧化钠或盐酸，其中的氢氧化钠或盐酸，虽然只是作为酸碱调节剂，加入的量较少，但由于其属于强酸或强碱，电离后产生的阳离子和阴离子仍会对试验产生一定的影响。因此，迫切需要开发一种更安全、更长效的新型酶标板稳定剂。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于维持酶标板中蛋白活性的由多组分构成的、稳定杆的长效酶标板稳定剂。

本发明的技术方案如下：

本发明的长效酶标板稳定剂，每100ml水中，含有：

蛋白质             0.1-5g

糖类物质           1-15g

有机物             0.1-10g

防腐剂             0.01-0.1% (V/V)

缓冲液盐类         10-200mM pH7.2-7.4

所述的蛋白质为重组人血清白蛋白、牛血清白蛋白、卵清白蛋白或酪蛋白水解物中的一种或两种以上；

所述的糖类物质为葡萄糖、肌糖、菊糖、麦芽糖糊精、右旋糖酐或肝素中的一种或两种以上；

所述的有机物为甘油、山梨醇、精氨酸、甘氨酸、甘露醇、脯氨酸、谷氨酸钠、谷氨酸、丙氨酸、赖氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、甲基丙烯酸酯类或聚乙烯亚胺中的一种或两种以上；

所述的防腐剂为ProClin150、ProClin200、ProClin300或ProClin5000中的一种；

所述的缓冲液盐类为磷酸盐缓冲液和/或NaCl-EDTANa缓冲液。

进一步的，本发明还包括金属离子螯合剂。

进一步的，本发明所述的蛋白质为牛血清白蛋白或酪蛋白水解物。

进一步的，本发明所述的糖类物质为菊糖或右旋糖酐。

进一步的，本发明所述的有机物为甘油、山梨醇或甘露醇。

进一步的，本发明所述的缓冲液盐类为磷酸盐缓冲液。

进一步的，本发明所述的金属离子螯合剂为乙二胺四乙酸二钠盐。

其中所述蛋白质的作用是吸附于酶标板上，将酶标板上的结合位点全部填充，使酶标板上的蛋白质达到一定的浓度，即起到封闭的作用，又可以保持酶与目的蛋白的稳定性。

其中所述糖类物质的作用是阻止蛋白质结构的改变，防止蛋白质的伸展和聚集，并提供一种亲水的整体环境，可以显著提高酶与目的蛋白的稳定性。

其中所述有机物的作用是：使得目的蛋白优先与水分子结合，蛋白质表面张力增加，化学势提高，从而提高了整个蛋白质分子的稳定性。