[发明专利]用于检测六价钼离子的酶联免疫试剂盒及其组建和检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及酶联免疫和六价钼离子检测领域，特别是涉及一种用于检测六价钼离子的酶联免疫试剂盒及组建和检测方法。

背景技术

我国具有丰富的钼矿资源，总储量840万吨，钼作为一种过渡态金属元素，其化合物呈现五种价态，其中六价钼最为稳定，也与人类的生命活动关系最为密切，缺乏与过量均会影响生命的质量。钼是有机体必需的微量元素之一，人体各种组织都含钼，成人体内总量为9 mg，肝脏、肾脏含量最高。钼元素本身没有生物活性，只有六价钼离子与嘌呤结合形成辅酶后才具有生物活性，其生理功能主要有维持正常的新陈代谢，提高动脉壁的弹性，减少心血管疾病，通过抗氧化作用提高机体免疫机能，并可抑制亚硝胺类致癌物质在体内的合成，具有抗癌作用；六价钼缺乏会导致龋齿、肾结石、克山病、大骨节病、食道癌等疾病。但同时六价钼过量能够引起机体中毒，人体摄取量超过10～15 mg时，会导致生长发育迟缓，体重下降，甚至发生痛风样综合症、关节疼痛及畸形、肺部变性等病症。动物钼中毒表现类似铜缺乏病，1938年Ferguson首次报道了牧草中钼含量过高，可使放牧牛产生持续性腹泻、被毛脱色为特征的中毒性疾病。英国的“牛腹泻病”、新西兰的“牛泥炭泻”和澳大利亚“牛地方性血尿症”和我国1981年赣南地区发生的耕牛“红皮白毛症”等，都是六价钼中毒的典型事件。在自然状态下六价钼对生物体没有危害，但由于钼被广泛应用于特种钢、机械、石油、化工、国防、航空航天、电子、核工业等诸多领域，钼矿大量开采，六价钼离子以各种形式进入自然界，环境污染急剧加重，加之累积效应和生物富集作用，对环境污染和人类健康构成了严重威胁。因此，对环境土壤、水源、饲料、食品中六价钼含量的检测意义重大。

目前，检测环境六价钼离子主要采用理化分析方法和免疫分析方法，理化分析方法包括紫外分光光度法（UV）、电化学分析法（EC）、原子吸收光谱法（AAS）、电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）、电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）、氢化物发生-原子荧光光谱法（HG-AFS）、中子活化分析法（NAA）等。这些方法各有优缺点，紫外分光光度法操作简单，快速，干扰小，但其灵敏度不高；电化学分析法灵敏、简便，对操作人员技术要求高；原子吸收光谱法、电感耦合等离子体质谱法、电感耦合等离子体原子发射光谱法、氢化物发生-原子荧光光谱法具有选择性好、测定精度高、简单、快速等优点，但所用仪器比较昂贵，只能在实验室进行检测，且对操作人员技术要求较为严格，限制了其广泛使用；中子活化分析法是一种以核反应为基础的分析方法，具有微量、快速、准确和非破坏性且同时可分析多元素的优点，但所需设备一般实验室不具备，很难得到广泛应用。自1985年Reardan等首次通过金属-鳌合剂人工抗原制备出重金属铟（In）单克隆抗体（mAb）并建立免疫分析方法以来，国内外重金属污染免疫检测技术的研究非常活跃，但对于六价钼离子的免疫检测技术目前还处于实验室阶段。

因此，建立快速、简便、敏感、特异、经济、筛检量大的六价钼离子免疫检测技术，对于减少环境污染、提高食品质量和保障食品安全具有重要意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题：提供一种能够快速、简便、敏感、特异的检测六价钼离子的酶联免疫试剂盒；

还提供了该酶联免疫试剂盒的组建方法以及检测方法。

本发明的技术方案：

一种用于检测六价钼离子的间接竞争酶联免疫试剂盒，包括盒体，盒体内设有用六价钼离子包被抗原包被过的酶标板、抗六价钼离子单克隆抗体抗、酶标二抗、底物显色液、终止液、六价钼离子标准溶液、洗液浓缩液、样品处理液。

所述六价钼离子包被抗原是由以下方法制备的：