[发明专利]一种提纯金腰酚D的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物分离技术领域，特别涉及一种采用大孔树脂和聚酰胺联用制备高纯度金腰酚D的工艺。 

背景技术

金腰酚D（Chrysosplenol D），分子式C₁₈H₁₆O₈，分子量360.32，结构式为： 

。

金腰酚D属黄酮类化合物，黄色针晶状（甲醇-水），mp236-238℃。小檗科(Berberidaceae)植物三叶裸花草(Achlys triphylla(Smth)DC.)的地下部分，菊科(Compositae)植物藁本蓍(Achillea ligustica All)的地上部分、黄花蒿(Aremisia annua L)、西班牙蒿(Artemisia hispanica Lam.non Weber ex Stcchm)的地上部分、匍匐生根蒿(Artemisia reptans C.Sm.)的地上部分，虎耳草科(Saxifragaceae)植物互叶金腰(Chrysosplenium alternifolium L.)、格雷金腰(Chrysosplenium grayanum Maxim)以及马鞭草科(Verbenaceae)植物蔓荆子(Vitex trifolia L.)的果实中都含有金腰酚D。 

实验研究表明，金腰酚D具有抗菌作用，在TLC板上5μg时,抑制瓜枝孢Cladosporium cucumerinum 的生长。对蜡样芽孢杆菌的MIC为4μg；具有醛糖还原酶抑制剂；对体外对恶性疟原虫的IC50为24～65μM,显著增强青蒿素的抗疟效果；能显著抑制32Pi掺入到HeLa细胞的磷脂中。 

现有提取金腰酚D多是乙醇提取或水煎煮，再经大孔树脂吸附或萃取。如专利申请号200810059049“ 一种从桑叶中提取黄酮、多糖的方法”，公开的方法采用乙醇超声提取制备出低含量金腰酚D。还如专利200810236144“一种联产金腰酚D、多糖和生物碱”，公开的方法采用水加热浸提、大孔树脂吸附。还如陈建明等发表的“AB-8大孔树脂分离纯化金腰酚D的工艺研究”也是采取乙醇超声提取。这些方法存在着醇耗大或工业化难度大，所得金腰酚D含量比较低。 

发明内容

本发明的目的是为了克服以上述已有工艺缺陷和不足，提供一种高纯度金腰酚D生产工艺。 

本发明的目的是这样来实现的： 

一种提纯金腰酚D的方法，其特征在于包括以下几个步骤：

1）将互叶金腰粉碎，用6-10倍量ph9-12碱水40-60℃动态提取1-3小时，提取2-3次，合并提取液；

2）提取液调ph5-6加入大孔树脂柱吸附，水—醇洗脱，收集金腰酚D流分，减压浓缩至密度1.2-1.3；

3）浓缩液加入聚酰胺树脂烘干，再1：2聚酰胺树脂装柱，水→醇梯度洗脱，收集金腰酚D流分调ph1-3，静置结晶；

4）重结晶：将上述结晶物滤出,用70-80%乙醇回流溶解静置结晶2-3次，干燥即得产品。

步骤1）中的碱可选氢氧化钠或氢氧化钙。优选氢氧化钙。 

步骤2）、3）中的调ph的可选盐酸、硫酸或磷酸的一种。 

步骤2）中大孔树脂可选D101或SPD100，水—醇洗脱为水洗中性再5-6BV650-70%乙醇洗脱金腰酚D。优选65%乙醇 

步骤3）中的水-醇梯度洗脱顺序为5-7BV水-4-6BV10-30%乙醇-5-6BV60-80%乙醇。

综上所述，本发明存在以下优点： 

1）碱水提取，黄酮溶出快，无需浓缩，直接上柱。

2）大孔树脂和聚酰胺柱的应用，除杂效果好，中间产物更易纯化。 

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。 

具体实施方式：

实施例1：