[发明专利]岩白菜嫩叶组培快繁方法无效

专利信息
申请号: 201310319683.2 申请日: 2013-07-26
公开(公告)号: CN103392599A 公开(公告)日: 2013-11-20
发明(设计)人: 王仕玉;郭凤根;李文春;龙雯虹 申请(专利权)人: 云南农业大学
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00;A01H5/12
代理公司: 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 代理人: 龚燮英
地址: 650201 *** 国省代码: 云南;53
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摘要:
搜索关键词: 白菜 嫩叶 组培快繁 方法
【权利要求书】:

1.一种岩白菜嫩叶组培快繁方法,其特征是:该方法包括以下步骤,

步骤1):外植体的取材和消毒灭菌

选取健康、新鲜的未展或初展开嫩叶,用自来水冲洗干净,先用70%酒精消毒30s,再用0.1%升汞溶液灭菌6~7min,最后用无菌水冲洗3~4次,在超净台无菌条件下将叶片切成约1.0cm2的方块作为待接种用外植体;

步骤2):愈伤组织诱导培养

将由步骤1)得到的大小约1.0cm2的叶块接种到愈伤组织诱导培养基上,在23℃恒温培养箱中,1500~2500Lx,光照12h/d培养,25~30d形成愈伤组织;

步骤3):不定芽诱导培养

将由步骤2)得到的愈伤组织块转接至不定芽诱导培养基上,在22±2℃,1500Lx,光照10~12h/d培养,15-20d形成不定芽;

步骤4):芽增殖培养

将由步骤3)得到的丛生不定芽转接至芽增殖培养基中,在22±2℃,1500Lx,光照10~12h/d培养,15~25d形成继代丛生芽,依丛生芽数量的需求,每隔20~25d依同法进行转接再增殖;

步骤5):生根培养

将由步骤4)得到的、苗高2~3cm的无根苗转接至生根培养基上,在22±2℃,1500Lx,每天10~12h光照条件下培养25~30d,基部形成10条根以上,即成为生根组培苗;

步骤6):炼苗移栽

瓶内炼苗:将由步骤5)得到的生根组培苗带瓶移出培养室外,在普通大棚内自然光照和温度条件下放置1周,然后打开瓶盖炼苗2~3d;

移栽炼苗:自来水洗净组培苗根部培养基,用灭菌和生根混合溶液浸泡根部30s至1min,稍沥干后移栽至珍珠岩和蛭石对半混合的基质中,注意喷雾保湿和避免强光照射,两周后进入常规管理,组培苗移栽成活率90%以上,继续培养1~2个月后即得岩白菜种苗。

2.根据权利要求1所述的岩白菜嫩叶组培快繁方法,其特征是:步骤2)中所述的愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D0.2mg/L+6-BA0.5mg/L+NAA0.4mg/L+活性炭3g/L。

3.根据权利要求1所述的岩白菜嫩叶组培快繁方法,其特征是:步骤3)中所述的不定芽诱导培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+活性炭3g/L。

4.根据权利要求1所述的岩白菜嫩叶组培快繁方法,其特征是:步骤4)中所述的芽增殖培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+KT2.0mg/L+活性炭3g/L。

5.根据权利要求1所述的岩白菜嫩叶组培快繁方法,其特征是:步骤5)中所述的生根培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L+活性炭3g/L。

6.根据权利要求2-5任一所述的岩白菜嫩叶组培快繁方法,其特征是:所述MS为MS培养基,其中含有蔗糖30g/L,琼脂条8g/L,其pH为5.5~6.0。

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