[发明专利]一种防控水稻纹枯病的生物防治菌株、生物有机肥及其制备方法

权利要求书

1.一种防控水稻纹枯病的生物防治菌株，其特征为该菌株为棘孢木霉12（Trichoderma asperellum 12），2013年5月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为武汉市武昌珞珈山，菌株保藏号为CCTCC NO：M 2013213，简称为棘孢木霉CCTCC NO：M 2013213。

2.根据权利要求1一种防控水稻纹枯病的生物防治菌株，其特征在于所述的棘孢木霉CCTCC NO：M 2013213的主要生物学特性为：在PDA培养基上28℃培养3天，菌丝可以布满整个培养皿，菌丝生长初期白色，毡状，由中心至边缘逐渐形成环状，靠近边缘环状菌丝颜色较浅，在靠近中心同心圆上产生稠密的暗绿色分生孢子，生长菌丝的培养皿散发出很重的椰汁芳香气味，背面深黄色；分生孢子梗对生生长，呈树状分枝，暗绿色，瓶梗短，基部变细，中间膨大；分生孢子呈球形，表面粗糙，大小为3.5～5.0 μm×2.0～5.0 μm；ITS序列进化分析显示该菌株为棘孢木霉T. asperellum。

3.一种生物有机肥料，其特征在于含有0.5×10⁸cfu g^-1以上权利要求1或2所述的棘孢木霉CCTCC NO：M 2013213菌株休眠孢子、含水量低于15%、有机质含量大于35%。

4.一种权利要求3所述的生物有机肥料的制备方法，其特征在于按如下步骤实现：

1）将权利要求1所述的棘孢木霉CCTCC NO：M 2013213接种到PDA培养液，进行液体发酵生产，其发酵生产的条件为：初始pH自然，培养温度25~30℃，溶氧通气量范围为30～100％，170rpm，发酵后期菌丝球全部打碎成菌丝片段，发酵液菌株的菌落形成单位≥1×10⁸cfu ml^-1；

2）稻壳、秸秆和鸡粪按照50：30：20比例堆肥，15~30天后，稻壳软化、秸秆腐烂，基质100℃灭菌36小时，高温干燥，干燥后基质含水量低于5%，形成固体发酵基质；

3）将步骤（1）中所述的发酵液按200 L/吨的接种量接种到步骤（2）所述的固体发酵基质进行固体发酵，发酵温度为20~35℃，发酵过程中翻堆2~3次，发酵10~15天后结束；形成固体发酵物；

4）将步骤（3）固体发酵物按照体积比20%~30%接种到腐熟的猪粪堆肥或牛粪堆肥，并后熟5~8天，后熟过程中翻堆3~5次，最后在温度不超过35℃的条件下将生物有机肥的含水量蒸发至15%以下，包装出厂即为防治水稻纹枯病的生物有机肥料。

5.根据权利要求4所述生物有机肥料的制备方法，其特征在于其中步骤（1）所用PDA培养液配制方法为，以配制1L培养基为例：

用200 g土豆削皮后切成小块放到水里煮，沸腾后煮30 min，经过滤后滤液中加20 g普通蔗糖，定容至1000 ml，pH自然，121℃灭菌20 min。

6.根据权利要求4或5所述生物有机肥料的制备方法，其特征在于，其中步骤（4）所用腐熟后的猪粪或牛粪堆肥为发芽指数98%以上，有机质质量比含量≥35%，有机氮质量比含量为1.2%~2%，含水量质量比20%~30%。