[发明专利]一种基于浊点萃取提取补骨脂素和异补骨脂素的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物活性成分的提取技术领域，涉及一种基于浊点萃取提取补骨脂素和异补骨脂素的方法。 

背景技术

补骨脂素和异补骨脂素是补骨脂中重要的有效成分。由于补骨脂等在植物中的含量低，而单体提取率更低。研究高效的补骨脂素和异补骨脂素提取方法具有重要意义。事实上，单体提取率低的主要原因是第一步从植物中得到有效部位（粗提物）时，多数使用传统有机溶剂提取法，该工艺回流温度高，有效成分被氧化或分解破坏、造成提取率低。可见提高补骨脂粗提物提取率是实现高产率提取的前提和关键。 

针对植物补骨脂中有效部位提取的方法很多，主要有： 

1）有机溶剂提取法： 

有机溶剂提取法是以有机溶剂作为分散相的一种提取手段，这种方法适用于许多有机成分的提取，例如黄酮类、苷类、香豆素类等。也是目前提取植物中有效部位使用最多的一种提取方法。但主要缺点是：操作繁琐、提取率低、富集率差。尤其是使用甲醇等有毒有机溶剂，环境污染大、溶剂残留毒性高等。 

2）其它方法： 

为了克服溶剂提取法的上述缺点，人们对有效部位提取进行了改进，主要包括超临界萃取法、微波或超声波辅助提取法等。 

超临界萃取法,是以二氧化碳等作为超临界流体溶剂，提取植物补骨脂有效部位。但是超临界流体萃取法设备属高压设备，投资较大，常常需要有机夹带剂才能达到理想的分离效果。此方法不能避免有机溶剂的使用。 

微波或超声波辅助提取法：是利用微波或超声波辅助增加溶质在溶剂中 的溶解性的一种方法。多数情况下在实验室中使用。但仍需使用有机溶剂，无法避免这些溶剂的毒性和污染问题。 

浊点萃取技术（cloud point extraction，简称CPE）是一种新兴的环保型液-液萃取技术。浊点萃取技术以水代替有机溶剂作为萃取剂，通过加入少量表面活性剂产生浊点现象而达到高效提取分离目的。其原理是：表面活性剂分子在水溶液中能够形成亲水基团向外、憎水基团向内的胶束。该胶束溶液可以使微溶或不溶于水的有机物溶解度大大增加。同时，表面活性剂水溶液在加热到一定温度（浊点温度）以上，溶液变浑浊并出现分相。通过改变实验参数(如溶液的离子强度、温度等)引发相分离，最终实现溶质的高效富集和分离。 

与传统的液液萃取过程相比，浊点萃取分离技术的操作在两水相之间进行，所以避免了对人体有害的有机溶剂的使用，也避免了挥发性有机溶剂对环境的影响，而且能够保护被萃取物的原有性质，加快萃取分离速度，提高萃取富集率。而且该技术对于微量甚至痕量物质有良好的富集作用。 

发明内容

本发明解决的问题在于提供一种基于浊点萃取提取补骨脂素和异补骨脂素的方法，该方法无需有毒有害的有机溶剂，增加了提取率，降低了环境污染。 

本发明是通过以下技术方案来实现： 

一种基于浊点萃取提取补骨脂素和异补骨脂素的方法，包括以下操作： 

1）将补骨脂粉末与表面活性剂溶液充分混合后，并在超声条件下提取； 

2）提取完成后收集提取液，离心，收集上清液并加入电解质调节离子强度，然后在恒温水浴平衡，离心后上清液分相为表面活性剂的水溶液层和表面活性剂富集层； 

3）在分成两相之后，表面活性剂富集层用超滤膜过滤，回收表面活性剂， 滤液旋干，得到包含补骨脂素和异补骨脂素的脂溶性类粗提物。 

进一步，具体包括以下步骤： 

1）将补骨脂植物粉末加入到体积分数浓度为10～15%的表面活性剂溶液中，其中液固比为150mL:1g～200mL:1g，在旋涡混合器中充分混合，并于25℃下、300W超声处理器超声处理下，提取30～35min； 

2）提取完成后收集提取液，离心，收集上清液并加电解质调节离子强度，其中电解质浓度为2.5～3mol·L^-1，然后在50℃恒温水浴平衡35～45min后离心，上清液分相为表面活性剂的水溶液层和表面活性剂富集层； 

3）将表面活性剂富集层用0.45μm的超滤膜过滤，回收表面活性剂，滤液旋干，即得包含补骨脂素和异补骨脂素的粗提物。 

所述步骤1）中，表面活性剂的体积浓度为15%，液固比在150mL:1g，提取时间为30min； 

所述步骤2）中，加入2.5mol·L^-1的氯化钠下在50℃恒温水浴平衡40min。 

所述的表面活性剂包括：阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、两性离子表面活性剂和非离子表面活性剂。