[发明专利]乳制品中植物甾醇的定量检测方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体地说，涉及一种乳制品中植物甾醇的定量检测方法。 

背景技术

植物甾醇是国家卫生部2010年第3号公告批准的新资源食品，是利用大豆油等植物油馏分或塔罗油为原料，通过皂化、萃取、结晶等工艺得到，然后将植物甾醇和葵花籽油脂肪酸进行酯化生产得到植物甾醇酯。 

植物甾醇存在于天然的蔬菜、水果、豆类、坚果和谷物中，是植物细胞膜的组成成分，植物甾醇能降低血中胆固醇浓度。这是因为植物甾醇的化学结构与胆固醇极其类似，可作竞争性抑制肠内胆固醇的水解，并在肠粘膜上皮细胞内抑制游离胆固醇的再酯化，以及能竞争性地占据肠内胆固醇的位置，减少胆固醇与肠粘膜细胞的接触机会，从而阻碍小肠对胆固醇的吸收，使其直接从粪便中排出。植物甾醇中所含有的成分最常见的包括β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇，其次是植物甾醇的饱和形式，即β-谷甾烷醇和菜油甾烷醇等。近年来，国内外对植物甾醇的检测方法，主要有高效液相色谱法、气相色谱法和气相色谱/质谱法。我国目前尚没有乳制品中植物甾醇的检测方法标准。 

发明内容

本发明的目的是提供一种乳制品中植物甾醇的定量检测方法。 

为了实现本发明目的，本发明的一种乳制品中植物甾醇的定量检测方法，包括以下步骤： 

1）样品的处理：向0.1-1.5克样品中加入0.667g/mL氢氧化钾溶液5-10mL和95%乙醇5-30mL，摇动使样品溶解，于70-100℃皂化1-4h； 然后加入有机溶剂萃取2-3次，合并有机相，用蒸馏水洗涤至中性；然后用无水硫酸钠脱水后，用旋转蒸发器蒸发至干，用正已烷分次（优选3次）将其转入10mL容量瓶中定容，即得试样；所述有机溶剂为正已烷、石油醚或乙醚等； 

2）标准溶液的配制：标准储备液的浓度为1.0mg/mL，标准工作液的浓度为50μg/mL； 

3）色谱分析：采用规格为30m×0.25mm×0.25μm的毛细管色谱柱Elite-1、规格为30m×0.32mm×0.25μm的毛细管色谱柱Elite-5或规格为30m×0.25mm×0.25μm的毛细管色谱柱Elite-35； 

色谱条件：进样口温度270-320℃；检测器温度270-310℃；程序升温180-290℃；载气为氮气，流速2mL/min；氢气流速40-45mL/min；空气流速400-450mL/min；进样量2μL；分流比10:1； 

4）标准曲线的绘制：将植物甾醇标准溶液进样后，以标样浓度对峰面积作标准曲线； 

5）试样中植物甾醇含量的测定：将试样进样，根据样品的峰面积，代入公式（I），计算得出试样中植物甾醇的含量； 

Xi=Ai×c×V×100As×m×1000]]>    （I） 

式中： 

X_i——试样中植物甾醇的含量； 

A_i——试样中植物甾醇的峰面积； 

A_S——植物甾醇标准工作液的峰面积； 

c——植物甾醇标准工作液浓度； 

V——试样的定容体积； 

m——试样的质量。 

本发明中涉及的植物甾醇为β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇等中的一种或多种。 

根据前述的定量检测方法，步骤1）中样品处理为：向0.2-1.2克 样品中加入0.667g/mL氢氧化钾溶液5-8mL和95%乙醇10-20mL，摇动使样品溶解，于80-100℃皂化1-3h；然后加入正已烷萃取2-3次。