[发明专利]人碱性成纤维细胞生长因子融合基因及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体地说，涉及人碱性成纤维细胞生长因子融合基因及其应用。

背景技术

成纤维细胞生长因子属于一个大的蛋白质家族，到目前为止，已发现了至少23个成员。其中，碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）是由Gospodarowicz等人于1974年从牛脑垂体中首次分离得到的，因它的等电点为9.6，呈碱性，故因此得名。

人碱性成纤维细胞生长因子（hbFGF）广泛存在于人体各种组织中,如脑、心、肝、骨、眼、肾上腺、胎盘等组织，并以脑和垂体中含量为最高。它是一种广谱的有丝分裂原,对来源于中胚层和神经外胚层的细胞具有明显的促进增殖作用，其靶细胞有成纤维细胞、血管内皮细胞、软骨细胞和成骨细胞等。它的生物学功能主要有：1）促进新生血管形成;2）促进软组织,软骨、骨组织及神经组织损伤的修复;3）促进肢体再生（Gospodarowicz D,Cheng J,Lui G M,etal.,Isolation of brain fibroblast growth factor by heparin sepharose affinity chromatography:identity with pituitary fibroblast growth factor[J],Proc Natl Acad Sci USA,1984,81:6963-6967）；4）参与神经再生等。

bFGF在体内和体外均能明显促进新生血管形成，它对新生血管形成过程中的多个环节均有促进作用，可趋化血管内膜的各类细胞，并诱导这些细胞表达组织重建所需的血浆酶原激活剂、胶原酶、蛋白水解酶等，这些酶类通过促使血管内皮基膜降解和剌激内膜各类细胞增殖与迁移，诱导血管内皮细胞长入胶原基质中形成管腔，并促进神经元与新生血管共同生长。

组织损伤后，局部bFGF表达增加。bFGF不仅能够通过趋化作用使单核细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、纤维母细胞等向损伤局部聚集，而且能通过促血管生成、促进软组织和骨组织中各种与修复重建有关的细胞分裂增殖等途径，促进肉芽组织的生成，对组织的损伤修复起至关重要的作用。另外，外源性bFGF对于伤口愈合不良者（如糖尿病、放化疗、及免疫功能缺陷等病人）的伤口具有显著的促进愈合作用。

bFGF广泛存在于中枢及外周神经系统中，无论在体内还是在体外，均对多种神经元有维持生存和促进生长的作用，并能促进受损神经元的修复和再生。bFGF广泛的神经营养活性日益引起重视，并在治疗神经损伤、神经退行性病变、脑血管病和脑外伤引发的缺血性中枢神经损伤等临床领域初步得到应用。

迄今为止，在利用基因重组技术生产bFGF的过程中，表达出的bFGF需要经过一系列的纯化步骤提纯，不仅使得生产步骤繁琐，且在纯化过程中会损失产物。此外，在bFGF的表达阶段，表达产率仍然有待提高。