[发明专利]一株藤黄灰链霉菌YAAS0018菌株及其抗十字花科根肿病微生物制剂与应用

权利要求书

1.藤黄灰链霉菌（Streptomyces luteogriseus）YAAS0018CGMCC No.7628。

2.一种抗十字花科根肿病微生物制剂的制备方法，其其特征在于步骤如下：

（1）试管种培养

将藤黄灰链霉菌（Streptomyces luteogriseus）YAAS0018CGMCC No.7628菌株接种到试管固体培养基斜面上，于28℃下培养7天，获得试管种；所述的试管固体培养基的配方为：酵母膏4g，葡萄糖4g，麦芽膏5g，维生素B₁1mg，维生素B₆1mg，核黄素1mg，烟酸1mg，苯丙氨酸1mg，生物素1mg，丙氨酸0.3mg，FeSO₄·7H₂O20mg，MnCl₂·2H₂O10mg，ZnSO₄·7H₂O10mg，琼脂20g，水1000ml，pH7.8；

（2）液体种子培养

采用三角瓶摇瓶培养，方法是：

①配制液体种子培养基，按液体种子培养基配方所述的各成分及其含量混合而成液体种子培养基；所述的液体种子培养基的配方是：酵母膏4g，葡萄糖4g，麦芽膏5g，维生素B₁1mg，维生素B₆1mg，核黄素1mg，烟酸1mg，苯丙氨酸1mg，生物素1mg，丙氨酸0.3mg，FeSO₄·7H₂O20mg，MnCl₂·2H₂O10mg，ZnSO₄·7H₂O10mg，琼脂20g，水1000ml，pH7.8；

②在每个三角瓶中装入100ml所述的液体种子培养基，121°C灭菌30min，冷却后接入试管种，28°C下于转速为220rpm的摇床上培养72h；

（3）制备所述的抗十字花科根肿病微生物制剂

采用三角瓶摇瓶培养，方法是：

①配制液体发酵培养基，按液体发酵培养基配方所述的各成分及其含量混合而成液体发酵培养基；液体发酵培养基配方是：大豆粉20g，甘露醇20g，自来水1000ml，pH7.8；

②在每个三角瓶中装入200ml液体发酵培养基，121°C灭菌30min，冷却后接入10ml步骤（2）培养得到的液体种子，28°C下于转速为220rpm的摇床上培养120h得发酵液。

③在发酵液中加入等体积的质量分数为95%的乙醇，经摇床振荡10h后，用转速为4000rpm的离心机离心15min，取上清液并在旋转蒸发仪上55°C蒸发去除乙醇，用水稀释到原发酵液体积，即成为所述的抗十字花科根肿病微生物制剂。

3.一种抗十字花科根肿病微生物制剂，其特征在于：按权利要求2所述的抗十字花科根肿病微生物制剂的制备方法制备得到。

4.一种抗十字花科根肿病微生物制剂，含有权利要求1所述的藤黄灰链霉菌（Streptomyces luteogriseus）YAAS0018CGMCC No.7628。

5.权利要求1所述的藤黄灰链霉菌（Streptomyces luteogriseus）YAAS0018CGMCC No.7628在抗十字花科根肿病中的应用。

6.权利要求3或4所述的抗十字花科根肿病微生物制剂在抗十字花科根肿病中的应用。

7.权利要求1所述的藤黄灰链霉菌（Streptomyces luteogriseus）YAAS0018CGMCC No.7628的保存方法，其步骤如下：

（1）短期保存：将藤黄灰链霉菌（Streptomyces luteogriseus）YAAS0018CGMCC No.7628菌株接种在试管固体培养基斜面上，待菌苔长满后，移至2—8℃的冰箱中保藏，所述的试管固体培养基的配方是：酵母膏4g，葡萄糖4g，麦芽膏5g，维生素B₁1mg，维生素B₆1mg，核黄素1mg，烟酸1mg，苯丙氨酸1mg，生物素1mg，丙氨酸0.3mg，FeSO₄·7H₂O20mg，MnCl₂·2H₂O10mg，ZnSO₄·7H₂O10mg，琼脂20g，水1000ml，pH7.8。

（2）长期保存：将藤黄灰链霉菌（Streptomyces luteogriseus）YAAS0018CGMCC No.7628菌株接种在装有脱脂牛奶的安瓿管中，待菌苔长满后，用真空泵抽气至干，熔封后-20℃低温保存。