[发明专利]一种微波诱变选育高产粘乳酸杆菌突变菌株的方法

权利要求书

1.一种微波诱变选育高产粘乳酸杆菌突变菌株的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）产粘性菌株的初筛：

    乳酸菌菌株按1.0-1.2%接种到脱脂乳培养基后，然后移至恒温培养箱里37℃恒温培养，观察各脱脂乳液体培养基凝乳情况，筛选出乳清析出少、凝乳质构紧密、凝乳时间短的菌株；

（2）突变株的获得：

微波辐射：取对数生长期的菌液，用无菌生理盐水稀释、离心、洗净，将悬浮菌液稀释至10^-11，取1mL稀释后的菌悬液接入含49mL0.9%的生理盐水的50mL规格锥形瓶中，保鲜膜封口，进行微波诱变，采用的微波炉功率为380-420W、脉冲频率2400 -2500MHz，设置诱变时间为3-5min，采用连续诱变方式诱变，诱变过程中采用冰袋降温辅助诱变；

（3）突变株的初筛：

诱变后菌落的锥形瓶中取100ul滴入MRS固体培养基上进行涂布培养，然后从MRS培养基上挑选菌斑较大的，粘度较高的菌落；

（4）诱变后的菌种形态观察：

   对诱变培养后的菌种进行革兰氏染色，进一步观察诱变后的菌株的形态，选取形态较长，较粗菌株；

（5）突变菌种的复筛：

   将诱变后初筛菌株，再次接入脱脂乳中，37℃恒温培养至凝乳状态，测定粘度值；

（6）遗传稳定性的检测：

对诱变后的菌株进行传代培养，检测每代的凝乳的状况，产粘性及倒置显微镜下菌株形态稳定性，选取稳定性高菌株。

2.根据权利要求1所述的微波诱变选育高产粘乳酸杆菌突变菌株的方法，其特征在于：所述的步骤（2）中采用的微波炉功率为400W，脉冲频率为2450MHz。

3.根据权利要求1所述的微波诱变选育高产粘乳酸杆菌突变菌株的方法，其特征在于：所述的步骤（2）中诱变时间优选为3min。