[发明专利]一种绿蓝链霉菌Sv-29及其应用

说明书

技术领域:

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种绿蓝链霉菌（Streptomyces viridocyaneus）Sv-29菌株及其应用。 

背景技术:

链霉菌是一类重要的微生物资源，它以产生种类繁多、结构多样的生物活性物质而受到重视。在农用抗生素的研究开发中，80%的活性物质都源于土壤中的链霉菌，它具有周期短、易于研究、便于生产、无毒无害等优点，因此发掘利用土壤中具有抑菌活性的链霉菌是生物农药开发的一个重要途径。但随着研究的广泛和深入，发现新化合物的几率变得越来越低，而发现新化合物是药物开发的基本前提，微生物药物开发的最大问题是尽早排除已知化合物。本文在传统研究方法的基础上，结合气相色谱-质谱（GC-MS）技术，初步确定活性物质的结构，为开发利用新型抗生素奠定基础。 

芸薹链格孢（Alternaria brassicae）属半知菌亚门丝孢纲丝孢目暗色孢科链格孢属，是引起植物病害的重要病原真菌之一，侵染小麦、大豆、花生、棉花、番茄、桃、李、杏等多种植物，造成田间和产后损失。白菜黑斑病是由芸薹链格孢引起的真菌病害，一般通过种子传带形成异地扩散和蔓延，为害叶片和整株植物，严重影响产量和品质。尖孢镰孢菌萎焉转化型（Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum）属半知菌亚门丝孢纲瘤座孢目瘤座孢科镰孢属，侵染多种植物。棉花枯萎病由该病菌引起的维管束病害，靠土壤传播，防治难度较大，一旦发生，轻者致使棉花产量下降、纤维品质变劣、重者可造成绝产。 

对上述病害的防治主要是采用抗病品种、化学防治和生物防治。随着绿色农业的兴起，生物防治逐渐引起人们的重视。对这两种病害的生物防治研究进展较快，但开发力度仍然处于试验探索阶段，存在见效慢、稳定性差、药效受环境因素影响大等缺陷。本研究中的绿蓝链霉菌Sv-29能产生多种抗菌活性物质，对此两种病害具有较好的防治效果，应用前景广泛。 

发明内容：

本发明的目的在于提供一种绿蓝链霉菌Sv-29及其应用。 

发明人2012年3月从云南省曲靖市郊区的红栌根际土中分离得到一株生防菌株Sv-29，通过16SrDNA测序和生理生化指标鉴定，鉴定结果表明该细菌为绿蓝链霉菌（Streptomyces viridocyaneus），该菌株命名为绿蓝链霉菌（Streptomyces viridocyaneus），该菌株已经保存在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；地址：中国.北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2013年4月1日；保藏号为CGMCC No.7398。 

本发明的绿蓝链霉菌（S. viridocyaneus）Sv-29菌株能够产生多种抗菌活性物质，对多种病原真菌具有较好拮抗作用，作为制备防治植物真菌病害药物的应用。 

菌株Sv-29在PDA平板上对供试植物病原真菌具有广谱、高效的拮抗作用，其中对芸薹链格孢和尖孢镰孢菌萎焉转化型的拮抗作用最强，抑菌圈半径分别达到了10.8 mm和11.3 mm。对菌株进行发酵培养，分别利用丙酮、氯仿、乙酸乙酯萃取代谢产物GC-MS分析发现萃取物中含有多种化学成分，主要包括有机酸类、酯类、苯及其衍生物、烷烃、杂环化合物等几大类。其中发现下面4种物质：（1）11-Oxatetracyclo[5.3.2.0(2,7)]dodecan-9-one、（2）2-Vinyl-9[3-deoxy-.beta.-d-ribofuranosyl]hypoxanthine、（3）2-（Phenyl-piperidin-1-yl-methyl）（4）10-Methoxy-nb-.alpha.-Methylcorynantheol是主要的抗菌活性物质。在500 L发酵罐上进行中试工艺流程，通过液体发酵获得菌株Sv-29的培养物，采用麦饭石为载体得到可湿性粉剂。对制剂进行温室防治效果试验，结果显示制剂对白菜黑斑病和棉花枯萎病具有较强的防治作用，防治效果分别达到88.5%和91.0%。 

本发明的优点在于：绿蓝链霉菌（S. viridocyaneus）Sv-29菌株能够产生多种抗菌活性物质，对多种病原真菌具有较好拮抗作用；特别是对由芸薹链格孢引起的白菜黑斑病和由尖孢镰孢菌萎焉转化型引起的棉花枯萎病具有较强的防治作用，应用前景广泛。 

附图说明:

图1 显示菌株Sv-29产生的抗菌活性物质。其中：物质1、2、3、4标注 同表3。 

具体实施方式:

下面用实施例对本发明进行详细说明，实施例不对本发明构成任何限制。