[发明专利]含酚羟基的环境激素类化合物的表面增强拉曼检测方法

说明书

技术领域

本发明属于环境激素类化合物检测技术领域，特别涉及一种应用散射表面增强拉曼技术快速定性和痕量检测含酚羟基的环境激素类化合物的方法。

背景技术

环境激素，即环境荷尔蒙物质，又被称为“环境内分泌干扰物质”、“类激素物质”等。国际化学品安全规划小组为其定义：环境内分泌干扰物是指能够改变内分泌系统的功能并且对健康生物体或其后裔或亚群体产生有害影响的外源性物质。随着工业的发展，大量环境激素在制药、塑料制品添加剂生产、除草剂的使用和垃圾处理等过程中不断释放，对生态环境造成了巨大危害。

目前我国对这些环境激素普遍的检测方法主要是液相萃取和固相萃取高效液相色谱-质谱学法，该方法对痕量、超痕量环境激素的分析具有独特的专一性和较高的灵敏度。但是，色谱-质谱学方法需要有复杂的样品前处理过程，耗时长；要求具有良好的实验环境和训练有素的操作人员；以及昂贵的实验仪器、大量的色谱纯溶剂和定性定量用的标准品，这些都给该方法的普遍应用带来了困难。

表面增强拉曼散射（SERS）技术广泛应用于化学、生物分子的痕量检测，具有检测时间短、原位检测、实时检测、无损分析和灵敏度高等优点。但是该方法需要以高灵敏度的SERS基底作为基础，并且需要待测物与增强基底有较强的物理或化学吸附作用。含酚羟基的环境激素类化合物大多都不溶于水，并且通常很难与SERS基底有相互作用，因此限制了SERS检测技术在此类化合物上的应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种通过生成偶氮分子且利用表面增强拉曼技术对含酚羟基的环境激素类化合物进行定性及定量检测的方法，该方法不但提高了对这些污染物的检测灵敏度，而且克服了传统检测方法前处理复杂、耗时长等局限性。

本发明通过生成偶氮分子的方法，对待测分子（含酚羟基的环境激素类化合物）进行改性，使其带上容易与SERS基底作用的N=N键，从而通过间接的方法对这些分子实现定性及痕量定量检测。该方法所用的合成方法简单，快速；并且对含酚羟基的激素类化合物的检测方便，快捷，灵敏度较高，在含酚羟基的激素类化合物的检测中具有很大的应用前景，可为环境激素污染的检测提供一种新的检测手段。

一种通过生成偶氮分子且利用表面增强拉曼技术对含羟基的环境激素类化合物进行定性定量和痕量检测的方法，其步骤如下：

（1）将待检测的含酚羟基的环境激素类化合物溶于有机溶剂，制成待测溶液；

（2）将对氨基苯磺酸制成重氮盐正离子溶液；

（3）制备银溶胶的蒸馏水溶液；

（4）将步骤（1）配制的待测溶液和步骤（2）的溶液混合，反应生成环境激素类化合物的偶氮衍生物；

（5）将步骤（3）的溶液与步骤（4）的溶液等体积混合，取混合溶液进行表面增强拉曼检测，从而得到待检测的含羟基的环境激素类化合物的表面增强拉曼图谱；将图谱中两个固定特征峰的强度的比值与“待测分子浓度-拉曼光谱特征峰强度”标准曲线比对，得到环境激素类化合物的浓度，从而实现对待测分子的定性定量和痕量检测。

“待测分子浓度-拉曼光谱特征峰强度”标准曲线建立的步骤如下：

（1）将多组已知浓度的含酚羟基的环境激素类化合物溶于有机溶剂，制成待测溶液；

（2）将对氨基苯磺酸制成重氮盐正离子溶液；

（3）制备银溶胶的蒸馏水溶液；

（4）将步骤（1）配制的待测溶液和步骤（2）配制的溶液混合，制备得到含酚羟基的环境激素类化合物偶氮衍生物；

（5）将步骤（3）的溶液与步骤（4）的溶液等体积混合，然后进行表面增强拉曼检测，从而得到多组已知浓度的含酚羟基的环境激素类化合物偶氮衍生物的表面增强拉曼图谱；以含酚羟基的环境激素类化合物浓度的对数和对应图谱中两个固定特征峰的强度的比值建立曲线，即得到“待测分子浓度-拉曼光谱特征峰强度”标准曲线。

上述检测方法中所述的步骤（1）中，含酚羟基的环境激素类化合物包括邻位或对位有空位的环境激素类化合物，如雌酚酮、雌二醇、雌三醇、己雌酚、双酚A、脱氢异雄酮等；有机溶剂包括甲醇、乙醇等；待测溶液的浓度为1×10^-3～1×10^-10mol/L；

上述检测方法中所述的步骤（2）中，是在酸性条件下（pH值5～6）将对氨基苯磺酸溶液在剧烈搅拌下加入到亚硝酸钠溶液中（对氨基苯磺酸和亚硝酸摩尔比约为1：1～1.5）；