[发明专利]一种从紫杉醇浸膏分离纯化紫杉醇的方法

说明书

技术领域

本发明涉及分离纯化紫杉醇的技术领域，具体涉及一种从紫杉醇浸膏分离纯化紫杉醇的方法。

背景技术

紫杉醇（Taxol）的分子结构式如下：

紫杉醇是近二十年来世界上发现的最有希望的抗癌药物，于1967年首次从短叶红豆杉树皮中分离获得，已被美国FDA批准用于卵巢癌、乳腺癌以及非小细胞肺癌等的治疗。

紫杉醇属于二萜类生物碱，在红豆杉属植物中含量都很低，只有0.0004%和0.01%（w/w）之间。天然红豆杉资源极为有限，且红豆杉生长缓慢，无法满足紫杉醇生产的需要量。如此低的含量使从原料中提取和纯化该化合物以达到纯品要求是非常困难的，分离纯化过程中紫杉醇收率的高低，决定了企业效益的巨大差异。因此，如何改进紫杉醇的分离纯化工艺，是所有生产企业普遍重视的课题。

目前报道中使用的分离方法有很多，主要有硅胶柱层析法、氧化铝柱层析法、大孔树脂柱法、C18柱层析法等。

CN102417492A中，将紫杉醇粗品用氯仿溶解后加入硅胶制得干样，再进行柱层析，用三元流动相进行洗脱，洗脱液经浓缩、结晶和干燥得到紫杉醇半成品，再经二次柱层析分离制得纯品。此类方法操作过程中较简便，但使用三元流动相，在大规模生产中溶剂无法重复利用，成本较大。

CN102838568A中，将经甲醇提取、氯仿萃取后的起始物料经氯仿-甲醇、正己烷-乙酸乙酯两次硅胶柱层析后得到紫杉醇粗品，再进行第三次正相柱层析，用经化学处理的硅胶作为固定相，分离出来得最深处重结晶一次后得到98%以上的纯品。此方法在第三次柱层析时所用硅胶需进行化学处理，在大规模生产中应用性不强，且整个紫杉醇收率不高，有一定的局限性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从紫杉醇浸膏分离纯化紫杉醇的方法，所述方法所用溶剂品种相对较少，操作灵活简便，降低了成本，紫杉醇回收率较高，能够很好地应用到大规模生产中。

为了达到上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种从紫杉醇浸膏分离纯化紫杉醇的方法，所述方法包括如下步骤：

（1）在层析柱内加入空白硅胶完成装柱，然后将紫杉醇浸膏用有机溶剂溶解后加入硅胶拌匀制得干样，再将干样装入层析柱中，用流动相加低压进行洗脱，收集有效段；

（2）将步骤（1）所得的有效段进行浓缩干燥，用乙酸乙酯和正己烷进行结晶；

（3）在层析柱内加入空白硅胶完成装柱，然后将步骤（2）所得的晶体用有机溶剂溶解后加入硅胶拌匀制得干样，再将干样装入层析柱中，用流动相加低压进行洗脱，收集有效段；

（4）将步骤（3）所得的有效段进行浓缩干燥，将得到的干燥物用甲醇溶解后过氧化铝柱，然后用纯化水进行结晶，晶体再用甲醇和和纯化水重结晶一次，将重结晶得到的晶体干燥；

（5）将步骤（4）所得的干燥物用有机溶剂溶解，将得到的样液加入已用空白硅胶完成装柱的层析柱后，用流动相加高压进行洗脱，收集有效段；

（6）将步骤（5）所得的有效段进行浓缩干燥，用乙酸乙酯和正己烷进行结晶，得到纯度为98.5wt%以上的紫杉醇。

本发明所述空白硅胶即没有拌样品的硅胶。

其中，步骤（4）所述重结晶即晶体用甲醇溶解后，加入纯化水结晶。

步骤（1）所述紫杉醇浸膏从红豆杉树根中提取得到，该紫杉醇浸膏中紫杉醇的含量为1～3wt%，例如1.2wt%、1.4wt%、1.6wt%、1.8wt%、2wt%、2.2wt%、2.4wt%、2.6wt%、2.8wt%、2.9wt%。

步骤（1）所述有机溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮或乙酸乙酯中的任意一种或者至少两种的混合物。所述混合物例如乙酸乙酯和丙酮的混合物，丙酮和三氯甲烷的混合物，三氯甲烷和二氯甲烷的混合物，乙酸乙酯和三氯甲烷的混合物，丙酮和二氯甲烷的混合物，乙酸乙酯、丙酮和三氯甲烷的混合物，丙酮、三氯甲烷和二氯甲烷的混合物。

步骤（1）所述硅胶的目数为100～200目、200～300目、300～400目或500～800目，优选100～200目或200～300目，进一步优选100～200目，例如110目、120目、130目、140目、150目、160目、170目、180目、190目。