[发明专利]一种高纯度医药级菠萝蛋白酶的提取方法有效
申请号: | 201310235004.3 | 申请日: | 2013-06-09 |
公开(公告)号: | CN103305492A | 公开(公告)日: | 2013-09-18 |
发明(设计)人: | 诸辉;石亚妮;吴吕平 | 申请(专利权)人: | 诸辉 |
主分类号: | C12N9/50 | 分类号: | C12N9/50 |
代理公司: | 浙江永鼎律师事务所 33233 | 代理人: | 王梨华;陈丽霞 |
地址: | 315100 浙江省宁*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纯度 医药 菠萝 蛋白酶 提取 方法 | ||
1.一种高纯度医药级菠萝蛋白酶的提取方法,其特征在于:它包括如下步骤:
步骤一菠萝预处理,菠萝洗净后预冷处理;
步骤二粗粉碎,将预冷处理后的菠萝粉碎;
步骤三酶解,向粗粉碎后的菠萝块中加入木质素酶,酶解菠萝果肉细胞壁;
步骤四榨汁,酶解后的菠萝果肉,经压榨处理,获得菠萝果浆;
步骤五过滤,菠萝果浆经过粗过滤和循环过滤,获得带细渣的菠萝汁;
步骤六添加辅料,向带细渣的菠萝汁中添加辅料;
步骤七精过滤,精细过滤添加辅料的带细渣的菠萝汁,获得菠萝清液;
步骤八添加稳定剂,向菠萝清液中添加稳定剂乙二胺四乙酸二钠和抗坏血酸;
步骤九吸附剂吸附,向前一步添加稳定剂的菠萝清液中添加纤维素吸附剂,搅拌后静置,离心获得菠萝蛋白酶沉淀;
步骤十洗脱,加入去离子水和抗坏血酸至菠萝蛋白酶沉淀中,混合均匀后过滤得到菠萝蛋白酶清液;
步骤十一超滤,低温超滤菠萝蛋白酶清液,获得菠萝蛋白酶浓缩液;
步骤十二冷冻干燥获得成品,菠萝蛋白酶浓缩液经冷冻干燥后获得菠萝蛋白酶干固体。
2.根据权利要求1所述的一种高纯度医药级菠萝蛋白酶的提取方法,其特征在于:步骤一中,菠萝预冷处理的温度为0~5℃,预冷处理时间为20~30h。
3.根据权利要求1所述的一种高纯度医药级菠萝蛋白酶的提取方法,其特征在于:步骤三中,木质素酶的添加量占菠萝总质量的0.001%~0.01%。
4.根据权利要求1所述的一种高纯度医药级菠萝蛋白酶的提取方法,其特征在于:步骤五中,菠萝果浆的粗过滤采用袋式过滤机,循环过滤采用卧式过滤机。
5.根据权利要求1所述的一种高纯度医药级菠萝蛋白酶的提取方法,其特征在于:步骤六中,添加的辅料为防腐剂苯甲酸钠,添加量为带细渣菠萝汁总质量的0.05%~0.5%。
6.根据权利要求1所述的一种高纯度医药级菠萝蛋白酶的提取方法,其特征在于:步骤七中,采用压滤机过滤带细渣的菠萝汁。
7.根据权利要求1所述的一种高纯度医药级菠萝蛋白酶的提取方法,其特征在于:步骤八中,乙二胺四乙酸二钠的添加量为菠萝清液质量的0.01%~0.1%,抗坏血酸的添加量为菠萝清液质量的0.01%~0.1%。
8.根据权利要求1所述的一种高纯度医药级菠萝蛋白酶的提取方法,其特征在于:步骤九中,纤维素吸附剂添加量为菠萝清液质量的0.2%~0.8%,静置的温度为-2~5℃。
9.根据权利要求1所述的一种高纯度医药级菠萝蛋白酶的提取方法,其特征在于:步骤十中,去离子水的添加量为菠萝蛋白酶沉淀质量的5%~15%,抗坏血酸的添加量为菠萝蛋白酶沉淀质量的0.04%~0.1%。
10.根据权利要求1所述的一种高纯度医药级菠萝蛋白酶的提取方法,其特征在于:步骤十一中,超滤膜孔径的截留分子量为10000或20000,超滤温度为0~12℃。
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