[发明专利]一种罗布麻栅锈菌的扩繁方法

说明书

技术领域

本发明属于植物病理学范畴，涉及罗布麻重要病害锈病接种和扩繁技术，特别严重是一种罗布麻栅锈菌的扩繁方法。

背景技术

“罗布麻”一词是我国著名的农业经济学家董正钧先生，于50年代在新疆罗布泊发现其纤维的使用价值并命名。他所指的罗布麻是相当于原苏联林奈所创Apocynum属的所有职务的总称。属夹竹桃科，是多年生宿根草本植物，其叶子可以制茶、制药、纤维是高档服装的原料。罗布麻还是荒漠化治理的先锋植物，具有极强的抗逆性，是美化荒漠、防风固沙、涵养水源、改善局域环境最好的生态植物和功效显著的保健植物。在我国有3种，即罗布麻Apocynum venetum L；罗布白麻Poacynum hendersonii(Hook.f)Wodson；罗布紫麻Poacynum pictum(Schrenk)Baill。罗布麻每年生长一季，其根保留为次年萌发新株。同时，罗布麻根系发达，具有耐旱、耐盐碱、繁殖力强等特殊的生态习性，是荒漠化、盐碱化土地防风固沙、改良土壤的优势资源植物。在我国西部荒漠化、盐碱化地区生态治理中具有重要意义。

目前，罗布麻大量生长地区主要有青海达木盆地、甘肃，新疆等地区，上述地区土壤和气候条件严酷，野生罗布麻几近枯竭。近年来，挽救野生罗布麻、大面积人工栽培罗布麻进行荒漠化治理成为一个新的趋势，仅新疆戈宝红麻公司在阿勒泰地区栽培的罗布麻面积达到近5万亩。

罗布麻规模化种植主要病害是罗布麻栅锈菌引起的叶锈病，也称罗布麻锈病，通过研究发现，叶锈病可降低罗布麻产量，亦可影响罗布麻生理生化、医药保健功能及生态功能。

随着罗布麻的大规模种植，罗布麻锈病有大规模、大面积的爆发的趋势，而且发病速度快，扩散范围广，严重威胁罗布麻的生长，已经成为罗布麻种植中的首要病害和主要限制因子，是罗布麻资源保护以及种植生产过程中亟待解决的问题之一。

在近年的实际种植中，特别是在新疆阿勒泰种植区，罗布麻锈病一般在5月初就开始发生，7月中旬达到高峰，发病率高达100%，危害可持续到罗布麻生长季结束，造成叶片脱落、品质降低，茎秆枯死。

罗布麻规模化发展势在必行，但目前对罗布麻病害的研究几乎没有，从其他作物病害的研究发现，病害平均导致作物减产35%以上。

目前国内外关于罗布麻叶锈病（罗布麻栅锈菌）发生的时空规律、病原与寄主互作机理、病害诊断预测及防治、抗病机制等相关研究尚未开展。

探究解决上述科学问题需要野外调查和室内实验相结合，为了保证实验顺利有效开展，需要即时足量的提供菌源，即罗布麻栅锈菌，对罗布麻的种植业的健康发展胡着十分重要的意义。

但罗布麻病原标本多分布在西北内陆人烟稀少地区，交通不方便，采集保存难度大。罗布麻栅锈菌在常温下（20～35℃）存活时间只有7～10天，而且随着时间增加活性显著下降。同时，罗布麻栅锈菌的室内接种和扩繁对温度、湿度、光照强度和周期要求苛刻，接种扩繁难度大。要摸清栅锈病发病和防治，需要在室内和田间相结合，因此室内病原菌接种和扩繁技术亟需解决。

因此，一种能够保证罗布麻栅锈菌高效扩繁，满足实验对菌源的需要的罗布麻栅锈菌的扩繁方法就应运而生。

发明内容

本发明目的在于提供一种适于在室内研究罗布麻锈病生物学、流行学的接种、扩繁方法，以保证罗布麻栅锈菌高效扩繁，满足实验对菌源的需要，进而为罗布麻栅锈菌防治提供理论依据，保证罗布麻种植的高产、可持续性和罗布麻种植产业的健康发展。

本发明的目的是通过以下步骤实现的：

（1）离体叶片接种前消毒：用浓度为70～75%的酒精浸泡滤纸（直径9cm）2分钟后晾干，铺在培养皿中，采摘罗布麻活体叶片，用浓度为0.3～0.5%的次氯酸钠溶液消毒3～5分钟，再用无菌水冲洗3～5次。

（2）离体叶片培养：将冲洗好的罗布麻叶片平铺在滤纸表面，用滴管向滤纸滴上无菌水，至有水膜产生为止。

（3）离体叶片接菌：采集新鲜自然发病的罗布麻锈病病叶，铺在标本纸或卫生纸压紧带回室内，用接种针蘸取少量凡士林，挑取病叶夏孢子堆中的夏孢子，涂抹在离体叶片上，一个叶片涂抹8～12次，然后放在培养皿中并密封皿口，在20～28℃下，光暗交替环境培养6～14天，之后将产孢的离体叶片夹在吸水纸中保存在0～5℃环境中，所述的光暗交替为每10～14h光暗交替一次。

（4）活体接菌前处理：用喷壶均匀的向罗布麻叶片背部喷无菌水，至有水滴产生为止，破坏叶片表面的角质层。