[发明专利]一种百合花粉的贮藏方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种百合花粉的贮藏方法。

背景技术

花粉是有花植物的小孢子，萌发时产生含三个单倍体核的雄配子体，其包含着该植物的全部遗传信息，是植物杂交育种和种质资源保存的重要材料。花粉生活力是指花粉所具有的存活、生长、萌发或发育的能力，是杂交育种成功的关键因素之一。花粉寿命是花粉在一定条件下花粉保持生活力的期限。

百合(Lilium spp.)是重要的球根花卉。百合花粉的自然寿命短，杂交育种时常常会遇到父母本花期不遇和远距离杂交等问题，育种者需要通过花粉贮藏解决上述问题；另外,花粉贮藏也是百合种质资源的保存的重要技术。

百合种类繁多，成熟的百合花粉在自然条件下寿命只有1-3周，现有贮藏方法是将百合的花粉在低温或超低温条件下保存，通过控制温度来延长花粉的寿命，具体是将采集的百合花粉在恒定的5℃、-18℃等低温条件下保存，或在超低温-80℃及-196℃（液氮）的低温条件下保存。上述贮藏方法存在如下缺陷：

1、在5℃、-18℃等温度下，百合花粉寿命维持的时间较短，只能保持30-80天,并且花粉寿命保持的长短不稳定,不能满足育种者对百合花粉的周年或更长期的贮藏的要求。

2、超低温条件下保存,需要超低温冰箱或液氮,保存的成本高，使用时必须将贮藏的花粉在不同温度下依次逐步苏醒，程序复杂繁琐。

发明内容

本发明的目的是提供一种百合花粉的贮藏方法，该方法能使百合花粉的贮藏寿命在5℃温度下就能稳定地延长到1年以上，且保存方式简便实用。

申请人经研究发现，百合花粉寿命的长短除了受自身遗传特性影响外，环境条件尤其是温度和湿度对花粉的生活力有很大影响，其中环境湿度的影响相对更大，湿度过高过低都会严重影响花粉的贮藏寿命。在温度5℃条件下，相对湿度为60-70%时百合花粉的贮藏寿命最长，可以达到1年以上。

基于上述研究，本发明通过同时控制温度和湿度两个重要影响因子来延长百合花粉的寿命，其具体技术方案如下：

1）恒湿盐溶液—亚硝酸钠饱和溶液的配置；

2）将配置好的硝酸钠饱和溶液加入到在干燥器底部，至液面距离干燥器瓷板保持1-2cm间距，密封后备用；

3）将收集的花粉装入明胶空心胶囊中，盖上胶囊盖后，在胶囊两端各刺一个小孔，以利气体交换；

4）将装入花粉的胶囊放入信封或纸袋中，用回形针封口后放置在干燥器瓷板上，用回形针封口的目的是利于气体交换；

5）将干燥器密闭后放入5℃冰箱中长期保存。

步骤1）中，为了保证恒湿效果，亚硝酸钠饱和溶液用蒸馏水或纯水配制，所采用的亚硝酸钠为分析纯，所配制的亚硝酸钠饱和溶液在温度降到5℃时应有30%以上的亚硝酸钠析出；

步骤2）中，硝酸钠饱和溶液的加入量根据干燥器的规格大小定，干燥器规格根据冷藏箱的大小和需要贮藏的花粉量而定，可选用内径为100mm-180mm的不同规格干燥器。硝酸钠饱和溶液加入后使液面距离瓷板保持1-2cm距离的目的是防止操作时液体影响瓷板上方。

步骤3）中，为保证所采集的花粉具有较高生活力，所述花粉是开花当日采集的花粉，采集时用软毛刷来收集百合花粉；所采用的胶囊优选医用明胶空心硬胶囊，为不影响胶囊的透气性，每个胶囊装入量不超过20mg，胶囊两端的小孔孔径为0.5-0.7mm，过小不利于气体交换，过大会导致花粉泄出。

本发明具有如下优点和进步：

1、温度控制采用普通冷藏冰箱即可，简便易行；

2、亚硝酸钠饱和溶液恒湿，该溶液的相对湿度受温度变化的影响小，因此能够恒定溶液上方空气的相对湿度，保持三相热力学平衡，当温度在-5℃到30℃范围变化时干燥器内的相对湿度为63-66%，因此恒湿效果稳定；

3、采用明胶胶囊定量存放花粉，可以保证贮藏期间花粉周环境条件的均匀性和稳定性，而且花粉的取用时可以按实际需求量来去，方便简单。

4、本方法不仅能保持了温度恒定，而且能恒湿，在5℃温度和60-70%相对湿度下，百合花粉寿命可以保持1年以上。

具体实施方式

1）恒湿盐溶液亚—硝酸钠饱和溶液的配置

取100ml纯水，中加入亚硝酸钠110g，加热溶解。

2）取200ml配置好上述溶液加入到在内径为100mm的玻璃干燥器底部（GB/T15723-1995），至液面距离干燥器瓷板为1-2cm，密封后备用；