[发明专利]一种含6-溴吲哚满二酮的荔枝螺提取物及制备方法与其抗癌应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，尤其涉及一种含6-溴吲哚满二酮的荔枝螺提取物及制备方法与其抗癌应用。

背景技术

我国因乙肝患病率高而导致原发性肝癌发病人数居高不下，约占全球肝癌病人总数的55%，是严重威胁我国人民健康的重大疾病之一，因此寻找和开发安全有效的抗肝癌药物和治疗手段已迫在眉睫。海洋占地球表面积的2/3，有多达21万种已知的微生物、低等或高等动植物栖息于海洋水体，由于海洋环境的特殊性和生物多样性，海洋生物体的代谢酶系与陆地生物有较大差别，源于海洋生物的次生代谢产物多具有独特的生理活性，是抗肿瘤新药开发的宝贵资源。

荔枝螺（Thais Roeding）又称苦螺、辣螺，为食用螺类，隶属于软体动物门(Mollusca)，腹足动物纲（Gastropoda），新腹足目（Neogastropoda），骨螺科（Muricidae），主要分布在东南亚、澳大利亚和墨西哥湾等地区，我国闽、浙、粤沿海有分布。荔枝螺因生殖系统易受水污染影响发生畸变，目前主要用于海洋水体的污染监测，例如厦门近海海域有机锡污染对荔枝螺的性畸变作用等。由于自然分布的地区局限性，国内外对荔枝螺天然产物的分离与活性研究相对较少，李明等用免疫组织化学定位法发现疣荔枝螺（Thais clavigera）消化系统中存在具有镇痛和免疫调节作用的化合物甲硫氨酸脑啡肽（Methionine-Enkephali）；Chávezc从墨西哥荔枝螺Plicopurpura pansa，Plicopurpura columellaris，Plicopurpura patula鳃下腺分泌物中分离出5种挥发性的含溴生物碱，但未对其活性进行深入研究。目前关于荔枝螺抗癌方面的研究还未有报道，但对骨螺科其它种螺类的研究发现存在抗肿瘤活性成分。例如，对17种海洋软体动物卵物质分析，其中6种骨螺科动物卵内均含卤代吲哚生物碱，但不同种间成分有所不同，卤代吲哚生物碱可能是骨螺科共有特色次生代谢物。从Dicathais orbita、Hexaplex trunculus两种骨螺鳃下腺、生殖腺和卵囊中分离出Tyrin purple及其前体化合物（吲哚生物碱类），体内外试验证实具有抑菌、细胞毒性、抗癌及肌肉松弛等多种生理活性。

国内关于荔枝螺化学组分和抗肿瘤作用的研究较少，特别是对肝癌细胞的作用还未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种制备荔枝螺提取物的方法。

本发明提供的方法，包括如下步骤：

1）荔枝螺软体组织用醇水溶液浸提，收集提取液，除去醇，得到产物A；

所述荔枝螺软体组织为腮下腺、消化腺和直肠腺组织；

2）将所述产物A用有机溶液萃取，收集有机相，即得到荔枝螺提取物；所述有机溶液为正己烷或乙酸乙酯。

上述方法中，步骤1）中，所述醇水溶液为乙醇水溶液或甲醇水溶液；所述乙醇水溶液或甲醇水溶液的浓度具体为50%-100%；所述乙醇水溶液或甲醇水溶液的浓度进一步具体为80%。

上述方法中，步骤1）中，所述荔枝螺软体组织和所述醇水溶液的配比为20g：0.5-1.5L；所述荔枝螺软体组织和所述醇水溶液的配比具体为20g：1L；

所述除去醇的方法为减压浓缩。

上述方法中，所述方法为如下A或B：

A方法包括如下步骤：

步骤1），所述荔枝螺软体组织在体积百分含量为80%的乙醇水溶液中采用磁力搅拌的方式浸提，收集提取液，减压浓缩为浸膏；

步骤2），将所述浸膏溶于水，得到浸膏水溶液；用正己烷萃取所述浸膏水溶液，收集有机相，即得到荔枝螺提取物；

B方法包括如下步骤：

步骤1），所述荔枝螺软体组织在体积百分含量为80%的甲醇水溶液中采用超声波的方式浸提，收集提取液，减压浓缩为浸膏；

步骤2），将所述浸膏溶于水，得到浸膏水溶液；用乙酸乙酯萃取所述浸膏水溶液，收集有机相，即得到荔枝螺提取物。

上述方法中，A方法或B方法中：

步骤1），所述浸提的温度为4-40°C；所述浸提的温度具体为25°C或30°C；所述浸提为黑暗条件下进行；

所述浸提的次数为3-5次；

步骤2）中，所述萃取次数为2-3次。

A方法中，所述每次采用磁力搅拌的方式浸提的时间为1-24h；所述每次采用磁力搅拌的方式浸提的时间具体为24h；

B方法中，所述每次采用超声波的方式浸提的时间为1-60min；所述每次采用超声波的方式浸提的时间具体为60min；所述超声的功率为300W。