[发明专利]一种微型月季花诱导方法

权利要求书

1.一种微型月季花诱导方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）无菌苗的获取：

①取在温室或苗圃培育的月季盆栽苗的当年生枝条，以软毛刷去除表面灰尘后，置于盛有清水的器皿中；

②加入1滴蓝月亮牌洗洁精浸泡枝条30min，并不断摇动烧杯，流水冲洗1h，用滤纸吸干纸条表面水分，备用；

③将步骤②清洗后的月季枝条剪取长度为3cm左右的微型月季茎段，用C1₂灭菌30min，在超净工作台中，无菌蒸馏水浸泡清洗3次，再无菌滤纸吸干，备用；

④配制芽诱导及增殖培养基：MS+TDZ1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L+活性炭0.6g/L，pH为5.83-5.85，经121℃高压灭菌20min；

⑤将灭菌后的1L培养基平均盛放在20个植物组织培养瓶中，待培养基冷凝至室温；

⑥将步骤③备用的灭菌后的茎段剪取为1.5cm左右，形态学下端接种于步骤⑤分装好的芽诱导及增殖培养基中，每1个植物组织培养瓶中接种4个茎段，接种后标注日期，置于智能人工气候箱中培养30天；

⑦智能人工气候箱的培养条件为：25℃，光强2000lux，光周期为16小时光照，8小时黑暗，从而获得无菌苗；

（2）花芽诱导培养：

①在超净工作台中，切取生长健壮的微型月季组培苗单芽茎段，形态学下端接种于6种蔗糖浓度的花芽诱导培养基中；

②此6种花芽诱导培养基分别为：

YJ1:MS+TDZ1.0mg/L+琼脂7.2g/L+蔗糖70g/L；

YJ2:MS+TDZ1.0mg/L+琼脂7.2g/L+蔗糖65g/L；

YJ3:MS+TDZ1.0mg/L+琼脂7.2g/L+蔗糖55g/L；

YJ4:MS+TDZ1.0mg/L+琼脂7.2g/L+蔗糖40g/L；

YJ5:MS+TDZ1.0mg/L+琼脂7.2g/L+蔗糖30g/L；

YJ6:MS+TDZ1.0mg/L+琼脂7.2g/L+蔗糖15g/L；

③上述花芽诱导培养基pH均为5.83-5.85，经121℃高压灭菌20min后，每1L培养基倒20个植物组织培养瓶，待培养基冷凝至室温；

④接种步骤①中切取的微型月季组培苗单芽茎段分别接种到6种培养基中，每1个植物组织培养瓶中接种5个茎段，每种培养基接种10瓶，接种后标注日期，置于智能人工气候箱中培养40天；

⑤培养条件为：25℃，光强2000lux，光周期为16小时光照，8小时黑暗，获得微型月季的丛生芽；

（3）成花培养：

①将在6种花芽诱导培养基中培养40天的微型月季丛生芽切取为单丛，接种于芽增殖培养基：MS+TDZ1.0mg/L+NAA0.1mg/L+活性炭0.6g/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L（pH为5.83-5.85）中；

②在芽增殖培养基的植物组织培养瓶上，对来自6种花芽诱导培养基中微型月季丛生芽做好标记，置于人工气候箱中培养10天，诱导微型月季开花；

③培养条件为：25℃，光强2000lux，光周期为16小时光照，8小时黑暗；10天后统计结果。

2.根据权利要求1所述的一种微型月季花诱导方法，其特征在于：所述的C1₂制备过程是：取带瓶塞的容器，在其中放入一个泡沫板，向其中加入25mlNaClO，然后将需要灭菌的材料用镊子轻轻的放在泡沫板上，向其中加入1ml浓HCl，迅速盖紧瓶塞，使瓶内的NaClO和浓HCl反应30min，制得氯气对材料进行灭菌。