[发明专利]酸浆苦素A提取工艺及医药用途

说明书

技术领域

    本发明属于医药技术领域，涉及酸浆苦素A的提取工艺及其医药用途，具体涉及其在制备治疗肿瘤药物中的新用途。

 

背景技术

    恶性肿瘤（通称癌症）是当前危害人类生命健康的重要疾病之一。近20年来，在世界范围内或中国范围内，肿瘤的发病率与死亡率均呈上升的趋势。据WHO统计，2008年全世界约有1270万癌症新增患者，死亡人数达760万。我国2000年癌症发病人数180-200万，死亡140-150万。

    纤维肉瘤（fibrosarcoma）是一种成纤维细胞和胶原纤维细胞形成的恶性软组织肉瘤，曾一度被误以为是成人软组织肉瘤中发病率最高的一种，随着免疫组织化学及分子诊断学等新技术的应用以及软组织肉瘤分类的细化，最新的数据显示纤维肉瘤在软组织肉瘤中只占到10%（Am J Surg Pathol, 2010, 34: 1504-1513）。虽然其发病率不高，但由于其对常规化疗药物的反应率不高，其预后也不容乐观，易出现无法控制的全身转移。这就需要有新药的研究与开发应用于纤维肉瘤的治疗之中。

    恶性黑色素瘤（melanoma）是一种恶性程度相当高的恶性肿瘤，又称恶性黑瘤，黑色素瘤多数是在色素病变的基础上发生，少数发生于正常皮肤或粘膜的色素细胞。具体原因不明，多数认为与内分泌因素有关。恶性黑色素瘤的发生率在皮肤癌里占不到5%，但是每年的死亡率却是其他皮肤癌的3倍，因此对于黑色素瘤的治疗越来越成为研究的热点。黑色素瘤的早期治疗主要是手术广泛切除原发病源，由于黑色素瘤对放疗不敏感，晚期不能手术的或扩散性病变采用化疗联合细胞因子和肿瘤基因疫苗等进行治疗，即药物治疗联合免疫治疗（N Eng J Med, 2004, 351: 998-1012）。因此药物治疗对于晚期的恶性黑色素瘤的治疗起着至关重要的作用，急需有新药的研究与开发应用于恶性黑色素瘤的治疗之中。

死亡受体（death receptors）是一类受体超家族，包括Fas/CD95、TNFR （tumor necrosis factor receptor）、DR-3（death receptor 3）、DR-4和DR-5。当相应的配体与其结合以后，其通过在胞内的死亡结构域（death domain, DD）启动细胞内在一系列的机制，诱导细胞凋亡。其中Fas信号途径是最具代表性的死亡受体途径。当相应的配体与Fas受体结合后，膜上的受体就会发生二聚化，存在于胞浆中的结构域就会发生改变，之后募集细胞内的接头蛋白FADD（Fas-associated death domain），进而使FADD的另一端死亡效应结构域（death effector domain，DED）结构发生变化，继而募集procaspase-8，共同形成死亡诱导信号复合物（death inducing signaling complex, DISC），DISC形成后，可诱导procaspase-8自身激活，产生活性的caspase-8，活化的caspase-8则进一步激活下游的caspase-3，从而诱导凋亡（Science, 1998, 281: 1305-1308）。

p53基因家族调控着多种基因的表达，在阻滞细胞周期、促进细胞凋亡、维持基因组稳定和抑制肿瘤血管生成等方面具有重要的作用。野生型p53能够引导或促进细胞凋亡；与野生型 p53相反，突变型 p53 则对细胞凋亡有抑制作用。p53在细胞中的半衰期很短，主要是通过转录后的磷酸化和乙酰化使蛋白稳定。p53可在多个位点发生磷酸化，磷酸化还可促进 p53转位到细胞核内。细胞损伤较大、不能够被修复时，p53蛋白会促使细胞进行凋亡。Bcl-2家族中p53的靶基因主要有Bax，Noxa，PUMA和Bid。近期研究表明，p53可直接转位到线粒体上与线粒体膜上的Bcl-xL和Bcl-2 结合，增加线粒体膜通透性。此外，p53也可不通过转录途径，直接促进胞浆中的Bax转位到线粒体上，改变线粒体膜通透性。Noxa通过p53依赖和非依赖两条通路诱导凋亡，是p53诱导细胞凋亡的下游靶基因，通过线粒体定位域定位于线粒体外膜，置换出促凋亡Bax亚家族，Bax亚家族转位并嵌入到线粒体，使线粒体膜的通透性增强，而使线粒体内的细胞色素c释放入胞浆，细胞色素c能与凋亡蛋白酶活化因子Apaf-l及caspase-9形成复合体，进一步激活caspase-3，启动caspase级联反应，诱导细胞凋亡（Science, 2003, 302: 1036-1038）。