[发明专利]固定化枯草芽孢杆菌的制备方法及采用固定化枯草芽孢杆菌处理污水的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种固定化枯草芽孢杆菌的制备方法及一种有机污水的处理方法。

背景技术

固定化微生物是近些年的研究热点，如果微生物悬浮在模拟高浓度污水中，就会影响微生物的生长，并且微生物流失严重，而固定化微生物有利于微生物的生长且能够减少微生物的损失，便于进行连续型实验的操作。游离细菌生物量少，不能连续运行。枯草芽孢杆菌处理模拟高浓度有机污水的程度比较高，载体固定枯草芽孢杆菌，有利于菌种在载体上面的生长。固定化生物技术是指利用物理的或是化学的手段将游离的微生物固定在现有的空间区域内，使微生物不用悬浮在水中并还保留微生物的生物活性，也可以反复利用菌的方法手段。

固定化生物技术所选的微生物需是降解效果明显的优势菌种，其需要符合的条件有(1)有很高的活性的菌体；(2)能高效率的处理目标污染物的菌体；(3)生存竞争能力强，能在系统中有很高数量的存活率。

活性污泥处理污水的方法因活性污泥的成分复杂，成分里各种微生物处理污水的能力强弱不同，对有机物含量较高的污水降解能力不强，所以对高浓度有机污水的处理上存在一些问题。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有的处理污水的方法对有机物含量较高的污水降解能力不强的技术问题，提供了一种枯草芽孢杆菌固定化处理高浓度有机污水的方法。

固定化枯草芽孢杆菌的制备方法按照以下步骤进行：

一、配制牛肉膏蛋白胨培养液：将0.5-2g牛肉膏、2-6g葡萄糖、0.5-3g氯化钠和2-4g蛋白胨混合加入到150-250ml蒸馏水中，调节pH值为7-8，然后在121℃高压灭菌，得到牛肉膏蛋白胨培养液；

二、活化枯草芽孢杆菌：在无菌的条件下取一环枯草芽孢杆菌接种到牛肉膏蛋白胨培养液中，在30℃恒温摇床培养18-26h，得到枯草芽孢杆菌菌悬液；

三、将长为1-3mm、宽为1-3mm的远红外细菌屋用浓度为0.1mol/L的HCl浸泡4h，用去离子水冲洗至中性，烘干；

四、将25-35g经过步骤三处理的远红外细菌屋放入80-120ml牛肉膏蛋白胨培养液中，取20ml步骤二得到的枯草芽孢杆菌菌悬液进行离心，获得菌体沉淀，然后在无菌的环境下将菌体沉淀加入到含有远红外细菌屋的牛肉膏蛋白胨培养液中，在30℃恒温培养箱中固定培养40-60h，得到固定化枯草芽孢杆菌。

采用固定化枯草芽孢杆菌处理污水的方法按照以下步骤进行：

将25-35g固定化枯草芽孢杆菌加入到80-120ml灭菌的有机污水中，在30℃恒温培养20-30h，即完成固定化枯草芽孢杆菌处理污水。

采用本发明方法得到的远红外细菌屋固定枯草芽孢杆菌处理模拟高浓度有机污水的COD去除率为34％。同时，采用枯草芽孢杆菌固定化处理模拟高浓度有机污水的方法得到的细菌生物量多，能连续运行。

附图说明

图1是试验一固定化枯草芽孢杆菌处理有机污水的实验结果；

图2为没有固定枯草芽孢杆菌远红外细菌屋的扫描电镜照片；

图3是固定化枯草芽孢杆菌的扫描电镜照片。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式中固定化枯草芽孢杆菌的制备方法按照以下步骤进行：

一、配制牛肉膏蛋白胨培养液：将0.5-2g牛肉膏、2-6g葡萄糖、0.5-3g氯化钠和2-4g蛋白胨混合加入到150-250ml蒸馏水中，调节pH值为7-8，然后在121℃高压灭菌，得到牛肉膏蛋白胨培养液；

二、活化枯草芽孢杆菌：在无菌的条件下取一环枯草芽孢杆菌接种到牛肉膏蛋白胨培养液中，在30℃恒温摇床培养18-26h，得到枯草芽孢杆菌菌悬液；

三、将长为1-3mm、宽为1-3mm的远红外细菌屋用浓度为0.1mol/L的HCl浸泡4h，用去离子水冲洗至中性，烘干；

四、将25-35g经过步骤三处理的远红外细菌屋放入80-120ml牛肉膏蛋白胨培养液中，取20ml步骤二得到的枯草芽孢杆菌菌悬液进行离心，获得菌体沉淀，然后在无菌的环境下将菌体沉淀加入到含有远红外细菌屋的牛肉膏蛋白胨培养液中，在30℃恒温培养箱中固定培养40-60h，得到固定化枯草芽孢杆菌。

本实施方式中所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为购买得到，保藏编号为CGMCC 1.836。远红外细菌屋购自于上海市徐汇区宠鑫综合营业部，枯草芽孢杆菌为市售。